买专利卖专利找龙图腾，真高效！ 查专利查商标用IPTOP,全免费！专利年费监控用IP管家,真方便！

申请/专利权人：北京大学第三医院(北京大学第三临床医学院)

摘要：本发明一种可用于监测RNA提取、逆转录、qPCR效率以及数据均一化的方法，其包括RNA提取、cDNA合成和荧光定量PCR，其特征在于：在RNA提取的操作中加入序列为SEQIDNo.1的DAF外参基因；在RNA提取之后进行cDNA合成之前加入序列为SEQIDNo.2的EAT外参基因；在cDNA合成之后荧光定量PCR之前加入序列为SEQIDNo.3的SKN外参基因；通过荧光定量PCR测定DAF外参基因、EAT外参基因和SKN外参基因的Ct值；基于Ct值的增加与否判断结果是否可信。本发明的方法能提高数据的可靠性，使研究者能够更准确地解释实验结果，可作为标准化实验数据的重要工具，帮助消除实验操作、样本处理和其他非生物学因素造成的变异。

主权项：1.一种可用于监测RNA提取、逆转录、qPCR效率以及数据均一化的方法，其包括RNA提取、cDNA合成和荧光定量PCR，其特征在于：在RNA提取的操作中加入序列为SEQIDNo.1的DAF外参基因；在RNA提取之后进行cDNA合成之前加入序列为SEQIDNo.2的EAT外参基因；在cDNA合成之后荧光定量PCR之前加入序列为SEQIDNo.3的SKN外参基因；通过荧光定量PCR测定DAF外参基因、EAT外参基因和SKN外参基因的Ct值；如果DAF外参基因的Ct值增加，则说明RNA提取效率低；如果EAT外参基因的Ct值增加，则cDNA合成效率低；如果SKN外参基因的Ct值增加，则说明荧光定量PCT效率低；如果DAF外参基因、EAT外参基因和SKN外参基因的Ct值均不增加，则说明结果可信；其中，荧光定量PCR的正向和反向引物的序列如下：DAF荧光定量PCR正向引物：5-GTGATCGTGTGAATGTTCG-3；DAF荧光定量PCR反向引物：5-ATTCGCGGAAAACAGGATT-3；EAT荧光定量PCR正向引物：5-CGGCTCATCAACAGGAACCA-3；EAT荧光定量PCR反向引物：5-TAAGTTTCAGACCCGCTACGTG-3；SKN荧光定量PCR正向引物：5-CAACTTTCCGTAGAAACGAG-3；SKN荧光定量PCR反向引物：5-ACATAATTTCAGTGATTCGTCA-3。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 北京大学第三医院(北京大学第三临床医学院) 一种用于同时监测RNA提取、逆转录和qPCR效率的方法