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申请/专利权人：吉林大学
摘要：本发明提供了一种级联酶有序固定方法及在亚硝酸盐可视检测中的应用，并构建基于GOX@HRPDECN检测亚硝酸盐的反应体系，属于生物传感器技术领域。由于在GOX@HRPDECN中，级联酶分布有序，为中间产物的运输提供了特定路线，天然酶的催化效率和利用率进一步提高。蛋白无机纳米结构也对生物大分子起到保护作用，使级联反应酶在不适宜、极端环境中表现出更好的稳定性。因此借助GOX@HRPDECN优异的催化活性和稳定性，构建了液相反应体系检测亚硝酸盐。进一步将GOX@HRPDECN封装于具有固定和保护作用的多孔网络结构水凝胶中，在增强其稳定性和便携化的同时，实现了智能手机拍照后的图像输出，将图像转化为色坐标数据信息定量检测亚硝酸盐，为亚硝酸盐可视检测提供了技术支撑。
主权项：1.一种级联酶有序固定方法，其步骤如下：1将0.8mg的GOX溶于0.97mL的PBS缓冲液10mmolL、pH＝7.4，混匀后加入1.5mg的CuSO4·5H2O，在2.0mL离心管中混合3～5min，随后在4℃条件下静置12～15小时；2通过对步骤1中合成的物质在2000～3000rpm下离心1～3min后，去除上清液，加入1mL的PBS缓冲液10mmolL、pH＝7.4复溶，再加入HRP1.2mg混匀，在4℃下静置12～15小时；3通过对步骤2中合成的物质在2000～3000rpm下离心1～3min后，除去上清液，并用去离子水洗涤1～2次，以去除多余的蛋白；将得到的GOX@HRPDECN复溶于1mL的PBS缓冲液10mmolL、pH＝7.4，4℃储存备用。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 吉林大学 一种级联酶有序固定方法及在亚硝酸盐可视检测中的应用
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