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申请/专利权人：上海健康医学院;上海理工大学

摘要：本发明涉及一种基于高内涵成像的细胞耐药性检测方法、介质及电子设备，包括以下步骤：对待检测细胞进行荧光染色；对染色好的待检测细胞进行高内涵成像，获取对应的高内涵图像；对所述高内涵图像进行预处理；将预处理后的图像作为经训练的基于卷积神经网络的耐药性分类识别模型的输入，检测该待检测细胞所属耐药性类别。与现有技术相比，本发明具有简单可靠、效率高等优点。

主权项：1.一种基于高内涵成像的细胞耐药性检测方法，其特征在于，包括以下步骤：对待检测细胞进行荧光染色，采用至少两种荧光染色剂对所述待检测细胞进行荧光染色；对染色好的待检测细胞进行高内涵成像，获取对应的高内涵图像；对所述高内涵图像进行预处理；将预处理后的图像作为经训练的基于卷积神经网络的耐药性分类识别模型的输入，检测该待检测细胞所属耐药性类别；所述进行荧光染色的荧光染色剂包括Hoechst33342、MitoTrackerDeepRed、ConcanavalinAAlex488和DAPI，所述对待检测细胞进行荧光染色的具体过程包括：21弃去培养液，用2毫升PBS清洗两次，取MitoTrackerDeepRedFM储存液加入PBS稀释至250nM加入每孔，放入培养箱继续培养20分钟；22用PBS清洗3次，每次10分钟，吸走清洗液，用4％的多聚甲醛固定细胞20分钟后弃去染色液，用PBS清洗三次，并用含0.5％的TritonX-100在室温下透化细胞10分钟；23每孔使用200微升PBS稀释1微升的鬼笔环肽594储液，在室温下孵育20分钟进行染色后弃去并用PBS清洗三次；24取ConcanavalinA488工作液加入PBS稀释至50ugmL，每孔加入200uL染液在室温下孵育15分钟后，清洗三次后弃液；25每孔加入200微升DAPI染液，5分钟后吸取染液，用PBS清洗三次后吸走废液，每孔加入200uLPBS，保持细胞湿润放入高内涵成像系统进行成像；所述进行高内涵成像时，对成像参数进行调节，各荧光通道均匀显示，所述成像参数包括成像物镜、成像模式、对应板型、拍摄视野、自动聚焦参数、焦距偏移值和或通道曝光时间；高内涵成像过程具体为：31将染色好的孔板放入物品仓内，选择成像物镜、成像模式以及对应的板型；32选择孔内的拍摄视野以及所需的荧光通道；33调节自动聚焦设置，使视野中能初步成像；34设置焦距偏移值使样品能够清晰成像；35调整各个通道的曝光时间，使各个通道能够均匀显示；36设置实验名称以及实验组别，核对各通道的参数信息，开始图像采集；所述预处理包括裁剪、均匀光照和双边滤波增强处理。

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