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申请/专利权人：清华大学
摘要：本发明公开了一种可快速消除木质纤维素水解液胁迫因子的酿酒酵母人工细胞构建方法。通过过表达HAP4、ACS1和ZWF1提高酿酒酵母对糠醛、5‑羟甲基糠醛和香草醛的胞内消除能力。本发明的方法所构建的HAP4、ACS1和ZWF1过表达工程菌株SCH4AC1ZW1，相比于出发菌株酿酒酵母SC，在8h内胞内消除糠醛、5‑羟甲基糠醛和香草醛的能力分别提升了7‑45％。本发明为降低和消除木质纤维素水解液中胁迫因子对下游发酵的抑制作用提供了有效的解决方案。
主权项：1.以酿酒酵母SaccharomycescerevisiaeSC为出发菌株，构建可用于消除木质纤维素水解液中胁迫因子人工细胞的方法，包括以下步骤：1构建含目标基因HAP4、ACS1和ZWF1启动子区域切割位点的gRNA质粒；2以工业酿酒酵母菌株SaccharomycescerevisiaeSC基因组为模板，扩增UBI4和THD1的启动子；3将步骤1构建的gRNA质粒、Cas9质粒和步骤2扩增的强启动子利用CRISPRCas9基因编辑技术，实现同一菌株中HAP4、ACS1和ZWF13个基因同时过表达；4将步骤3获得的工程菌株用于除糠醛、5-羟甲基糠醛、香草醛等木质纤维素水解液中胁迫因子的消除。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 清华大学 酿酒酵母人工细胞构建及消除木质纤维素水解液胁迫因子的方法
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