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一种ω-转氨酶多位点组合突变体及其在制备西那卡塞药物中间体的应用 

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申请/专利权人:浙江科技学院

摘要:本发明公开了一种ω‑转氨酶多位点组合突变体及其在制备西那卡塞药物中间体的应用,涉及分子生物学技术领域。所述ω‑转氨酶多位点组合突变体是在氨基酸序列为SEQIDNo.2的基础上多位点组合突变得到,所述ω‑转氨酶多位点组合突变体的突变位点为以下任意一种:1V149AL182FL187FV62AV147FV116SE117IL118I,2V149AL182FL187FV62AV147F,3V149AL182FL187FV62A。本发明基于一种催化口袋关键氨基酸附近的相关氨基酸,确定需要突变的氨基酸残基位点,结合高通量显色的定量筛选方法,通过定点突变技术进行实验验证,该方法可有效地提高突变氨基酸位点的筛选概率,提高实验效率及可行性,并筛选得到热力学稳定性、酶活性明显优于野生酶的突变酶。

主权项:1.一种ω-转氨酶多位点组合突变体,其特征在于,所述ω-转氨酶多位点组合突变体是在氨基酸序列为SEQIDNo.2的基础上多位点组合突变得到,所述ω-转氨酶多位点组合突变体的突变位点为以下任意一种:1V149AL182FL187FV62AV147FV116SE117IL118I,2V149AL182FL187FV62AV147F,3V149AL182FL187FV62A。

全文数据:

权利要求:

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