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申请/专利权人：昆明理工大学

摘要：本发明公开了一种硫氮掺杂疏水性碳点用于β‑胡萝卜素荧光探针检测方法，本发明以柠檬酸、5,5'二硫代双（2‑硝基苯甲酸）、三聚氰胺为前驱，采用热解法制备了高荧光产率的硫氮掺杂疏水性碳点（h‑S,NCDs），基于内滤效应，β‑胡萝卜素选择性使h‑S,NCDs荧光猝灭，其荧光猝灭强度与β‑胡萝卜素呈线性关系，由此建立β‑胡萝卜素荧光检测新方法，本发明方法具有特异性强，可能共存的其他类胡萝卜素、维生素A及E等都不产生干扰，同时具有检测灵敏度高、操作简单、快速等特点；与GB5009.83‑2016食品安全国家标准食品中胡萝卜素的测定方法比对，结果一致，方法具有准确性。

主权项：1.一种硫氮掺杂疏水性碳点用于β-胡萝卜素荧光探针检测方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）β-胡萝卜素工作曲线制作在10mL具塞比色管中加入β-胡萝卜素标准溶液、浓度1mgmL的硫氮掺杂疏水性碳点50~100µL，用pH5.0的柠檬酸-无水乙醇溶液稀释至5mL，摇匀，其中β-胡萝卜素在具塞比色管中浓度在0.01~10µgg范围，静置5~10min，在350nm激发波长下，在405nm发射波长处测定荧光强度，以β-胡萝卜素浓度为横坐标，荧光强度为纵坐标，绘制标准曲线，得到回归方程；（2）样品处理①螺旋藻片：取螺旋藻片样品，研细，准确称取试样0.20~0.30g于25mL带塞量筒中，用石油醚-丙酮混合液超声30min，静置10~20min后，吸取上层液体，然后残渣再用石油醚-丙酮混合液超声提取2次，收集合并上层液体并旋转蒸发至干，将干燥残渣用二氯甲烷溶解，转移至棕色容量瓶中并定容至25mL，制得样品测定液；②复合预混合饲料样品：将1.00~2.00g复合预混合饲料添加至装有1gEDTA的三角瓶中，然后加入浓度1molL的L-抗坏血酸乙醇溶液50mL、1molL的氢氧化钾溶液10mL，在45~55℃下水浴超声20min，将该溶液转移至盛有石油醚的分液漏斗中，用水洗三角瓶，洗液并入分液漏斗，萃取后水相转移至另一分液漏斗中，用石油醚重复提取两次，收集合并石油醚相旋转蒸发至干，固体用二氯甲烷溶解，转移至棕色容量瓶并定容至25mL，制得样品测定液；③蔬菜样品：准确称取蔬菜1.00~2.00g，切碎并置于研钵内充分研磨10min，加入无水乙醇后移至圆底烧瓶内，在50~60℃水浴锅中恒温浸提180min，提取结束后将上清液滤出，滤渣离心处理，并再次取上清液，合并上清液，旋转蒸发至干，转移到棕色容量瓶中并用无水乙醇定容至25mL，制得样品测定液；（3）样品测定：取步骤（2）制备的样品测定液2~3mL，加入1mgmL硫氮掺杂疏水性碳点50~100µL，用pH5.0的柠檬酸-无水乙醇溶液稀释至5mL，摇匀，静置5~10min，在350nm激发波长下，在405nm发射波长处测定荧光强度，代入步骤（1）回归方程，计算样品β-胡萝卜素含量；所述硫氮掺杂疏水性碳点是将5,5'二硫代双（2-硝基苯甲酸）0.5~0.7g、三聚氰胺0.2~0.5g、柠檬酸0.1~0.3g溶解于50~80mL冰乙酸中，超声处理20~30min，转移至聚四氟乙烯反应釜，在200~220℃下加热8~10h，自然冷却后，将反应液倒入1~1.5L的沸水中，搅拌30~40min，抽滤，固体真空干燥即得硫氮掺杂疏水性碳点。

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