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申请/专利权人：浙江农林大学;浙江养生堂天然药物研究所有限公司;赣南师范大学
摘要：本发明提供了一种芸香科植物的遗传转化体系、遗传转化方法和应用，涉及遗传转化技术领域。本发明提供一种以发根农杆菌K599介导的，直接对芸香科植物的枝条进行遗传转化的遗传转化体系。利用本发明所述遗传转化体系可进行遗传转化和基因编辑，能够有效克服农杆菌转化法的诸多缺陷；遗传转化体系周期为14～28天，节省时间，有效缩短柑橘基因功能研究周期；遗传稳定性高，可以避免嵌合体的形成。利用本发明所述遗传转化体系进行遗传转化或基因编辑，获得的转化再生植株或基因编辑植株可以实现基因功能的验证，且所述遗传转化或基因编辑方法，无需无菌环境培育无菌苗，并且免除愈伤组织的诱导及组织培养的过程，简化实验操作，降低实验成本。
主权项：1.一种香橼的遗传转化方法，其特征在于，包括以下步骤：将用于基因编辑的Cas9质粒转入发根农杆菌AgrobacteriumrhizogenesK599的感受态细胞中，挑取阳性菌株经培养后提取菌体，利用MES浸润液重悬所述菌体至OD600值为0.6-1.0，于黑暗条件下放置3h，得介导液；将香橼的枝条底部完全浸入所述介导液中并真空浸润10-30min，得浸润枝条；将所述浸润枝条扦插后生根，得遗传转化香橼植株；所述枝条的长度为8～12cm，并携带1～2片叶，每片叶保留13面积；所述扦插的基质包括蛭石，并保持温度26～30℃；在所述生根后，还包括对生根植株进行遗传转化的检测。
全文数据：
权利要求：
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