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一种用于免疫沉淀特异谷胱甘肽修饰的蛋白的方法 

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申请/专利权人:苏州珂茂生物科技有限公司

摘要:本发明涉及生物技术领域,尤其涉及IPCG01N领域,更具体的,涉及一种用于免疫沉淀特异谷胱甘肽修饰的蛋白的方法。包括以下步骤:步骤1:从细胞中提取蛋白样品;步骤2:将蛋白样品进行活化,得到氧化型的谷胱甘肽;步骤3:过超滤柱,得到第一脱盐样品;步骤4:在第一脱盐样品中加入封闭剂,将谷胱甘肽中的半胱氨酸自由巯基封闭,得到烷基化游离硫醇;步骤5:加入还原剂,还原未被烷基化的巯基,得到带有游离硫醇基团半胱氨酸;步骤6:过超滤柱,得到第二脱盐样品;步骤7:将第二脱盐样品活化,加入生物素进行孵育,并过超滤柱,得到第三脱盐样品;步骤8:将第三脱盐样品进行纯化;步骤9:将纯化后的样品进行洗脱检测。

主权项:1.一种用于免疫沉淀特异谷胱甘肽修饰的蛋白的方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤1:从细胞中提取蛋白样品;步骤2:将蛋白样品进行活化,得到氧化型的谷胱甘肽;步骤3:过超滤柱,得到第一脱盐样品;步骤4:在第一脱盐样品中加入封闭剂,将谷胱甘肽中的半胱氨酸自由巯基封闭,得到烷基化游离硫醇;步骤5:加入还原剂,还原未被烷基化的巯基,得到带有游离硫醇基团半胱氨酸;步骤6:过超滤柱,得到第二脱盐样品;步骤7:将第二脱盐样品活化,加入生物素进行孵育,并过超滤柱,得到第三脱盐样品;步骤8:将第三脱盐样品进行纯化;步骤9:将纯化后的样品进行洗脱检测。

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