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申请/专利权人：江苏汇先医药技术有限公司
摘要：本发明涉及肿瘤细胞捕获技术领域，公开了一种间质型循环肿瘤细胞捕获方法，包括以下步骤：S1，芯片预处理：1在金属筛网芯片上镀惰性金属，确保芯片孔径大小均一，镀均匀；2将芯片置于无水乙醇中浸泡；3准备烧杯，并在烧杯中依次加入去离子水，25％氨水和30％双氧水，并放入油浴锅加热，将芯片置于烧杯中加热。本发明通过使用物理和抗体免疫技术捕获间质型细胞，对间质型细胞的捕获率具有较好的效果，可对临床间质细胞捕获提供有效的技术手段，可以在间质型细胞检测中节约成本、减少研发周期，提高CTC的捕获效率，实现血液中肿瘤细胞的快速检测，为肿瘤患者的诊断和用药治疗提供辅助依据。
主权项：1.一种间质型循环肿瘤细胞捕获方法，其特征在于，包括以下步骤：S1芯片预处理：1在金属筛网芯片上镀惰性金属，确保芯片孔径大小均一，镀均匀；2将芯片置于无水乙醇中浸泡；3准备烧杯，并在烧杯中依次加入去离子水，氨水和双氧水，并放入油浴锅加热，然后将芯片置于烧杯中加热；4加热完成后，清洗芯片；5对芯片进行干燥，并保存备用；S2，高分子包被芯片：1取巯基化透明质酸钠HA-SH加入EP管中，随后向EP管内加入金属筛网芯片，通过振荡器共混孵育；2孵育完成后，吸去巯基化透明质酸钠，加入PBS缓冲液进行洗涤，取出芯片自然风干；3将芯片取出置于洁净的孔板中，在芯片上加入EDC和Sulfo-NHS溶液，避光孵育；4孵育完成后，加入PBS缓冲液对芯片进行洗涤，取出芯片自然风干；5将风干芯片置于新的孔板中，并在芯片上加入含Vimentin抗体的MES缓冲液，孵育；6孵育完成后加入PBS缓冲液对芯片进行洗涤；7BSA溶液，孵育；8孵育完成后加入PBS对芯片进行洗涤；9将芯片置于PBS缓冲液中保存备用；S3，间质化细胞准备：1Hela细胞培养：细胞培养基：MEM培养基、7～12％胎牛血清、0.3～1.5％双抗；培养条件：3～7％二氧化碳，35～40℃培养箱中使用T25细胞培养瓶对Hela细胞进行培养；2细胞计数：梯度稀释后使用显微计数仪对Hela细胞进行计数，将一定数量的Hela细胞置于PBS中混合备用；S4，间质化细胞捕获。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 江苏汇先医药技术有限公司 一种间质型循环肿瘤细胞捕获方法
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