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申请/专利权人：山东省大健康精准医疗产业技术研究院

摘要：本发明涉及一种基于一测多评法同时定量检测体液中5种多酚的方法。所述方法是以白藜芦醇为内参物进行一测多评，建立白藜芦醇与反式白藜芦醇‑3‑O‑β‑D‑葡萄糖醛酸酯、反式白藜芦醇‑3‑硫酸盐、反式白藜芦醇‑4'‑O‑β‑D‑葡萄糖醛酸酯和反式白藜芦醇4'‑硫酸盐的相对校正因子，通过相对校正因子计算体液中5种多酚的含量。本发明通过一测多评法同时测定5个多酚指标成分的含量，只需使用白藜芦醇Trans‑Res一种标准品作为内参物，就可以可通过相对校正因子计算得到反式白藜芦醇‑3‑O‑β‑D‑葡萄糖醛酸酯、反式白藜芦醇‑3‑硫酸盐、反式白藜芦醇‑4'‑O‑β‑D‑葡萄糖醛酸酯和反式白藜芦醇4'‑硫酸盐的具体含量，具有操作简单，灵敏度高，测定准确，适用性强的优点。

主权项：1.一种基于一测多评法同时定量检测体液中5种多酚的方法，其特征在于，所述方法是以白藜芦醇为内参物进行一测多评，建立白藜芦醇与反式白藜芦醇-3-O-β-D-葡萄糖醛酸酯、反式白藜芦醇-3-硫酸盐、反式白藜芦醇-4'-O-β-D-葡萄糖醛酸酯和反式白藜芦醇4'-硫酸盐的相对校正因子，通过相对校正因子计算体液中5种多酚的含量，具体包括以下步骤：1单一标准品储备液制备：将反式白藜芦醇-3-O-β-D-葡萄糖醛酸酯、反式白藜芦醇-3-硫酸盐、反式白藜芦醇-4'-O-β-D-葡萄糖醛酸酯、反式白藜芦醇4'-硫酸盐和白藜芦醇标准品分别溶于乙腈中，得到反式白藜芦醇-3-O-β-D-葡萄糖醛酸酯、反式白藜芦醇-3-硫酸盐、反式白藜芦醇-4'-O-β-D-葡萄糖醛酸酯、反式白藜芦醇4'-硫酸盐和白藜芦醇的标准品溶液；2混合标准品溶液C制备：将步骤1所得5种标准品溶液等体积混合后，加入乙腈进行稀释，得到混合标准品溶液A；继续用乙腈稀释混合标准品溶液A，得到系列浓度的混合标准品溶液B；将大豆黄素溶于乙腈中，得到内标工作液；将系列浓度的混合标准品溶液B和内标工作液加入到空白体液中，得到系列浓度的混合标准品溶液C；3供试品溶液制备：将待测体液预处理后，进行微洗脱固相萃取，得到供试品溶液；4高效液相色谱-串联质谱检测：将步骤2所得系列浓度的混合标准品溶液C注入高效液相色谱-串联质谱仪进行检测，然后以反式白藜芦醇-3-O-β-D-葡萄糖醛酸酯、反式白藜芦醇-3-硫酸盐、反式白藜芦醇-4'-O-β-D-葡萄糖醛酸酯、反式白藜芦醇4'-硫酸盐和白藜芦醇的质量浓度X为横坐标，待测物峰面积内标峰面积Y为纵坐标，绘制标准曲线，根据标准曲线分别得到5种物质的含量和对应的峰面积比值；再以白藜芦醇为内参物，计算其他4种待测成分的相对校正因子f，计算公式为f＝fsfk＝Ck×AsCs×Ak；其中Ck为待测成分含量，Ak为待测成分峰面积，Cs为内参物含量，As为内参物峰面积；5将步骤3所得供试品溶液注入高效液相色谱仪，测定体液中白藜芦醇的含量，然后根据白藜芦醇与反式白藜芦醇-3-O-β-D-葡萄糖醛酸酯、反式白藜芦醇-3-硫酸盐、反式白藜芦醇-4'-O-β-D-葡萄糖醛酸酯和反式白藜芦醇4'-硫酸盐的相对校正因子进行计算，分别得到体液中其他4种多酚的含量。

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