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水黄皮真菌对稻褐飞虱的毒力、酶活性检测方法及其应用 

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申请/专利权人:中山火炬职业技术学院

摘要:本发明涉及分析检测技术领域,具体是水黄皮真菌对稻褐飞虱的毒力、酶活性检测方法及其应用。其中,水黄皮真菌对稻褐飞虱的毒力、酶活性检测方法,涵盖了水黄皮真菌菌株的分离纯化、稻褐飞虱的饲养与处理、毒力测定、以及稻褐飞虱体内保护酶和解毒酶活性的检测等多个环节,通过观察死亡率能够获知真菌对昆虫的直接毒力效应,也通过影响昆虫体内酶的活性以获知真菌对昆虫的间接效应,能够有效筛选优良菌株和分析菌株对稻褐飞虱作用机理,全面评估筛选菌株水黄皮真菌对稻褐飞虱的杀虫效果及其对稻褐飞虱生理状态的影响,为水黄皮真菌作为生物防治候选物的可能性提供科学依据,有助于开发新型的生物防治策略,减少对化学农药的依赖。

主权项:1.水黄皮真菌对稻褐飞虱的毒力、酶活性检测方法,其特征在于,包括以下步骤:S1、水黄皮树茎分离纯化鉴定并保存菌株,菌株的孢子悬液涂布在灭菌PDA平板上,恒温培养待其充分产孢后,称取适量孢子粉,备用;S2、稻褐飞虱成虫放入装有5%蜂蜜水棉球的烧瓶中,用食品级PE保鲜膜封口,若虫用水稻苗饲养;S3、取步骤S1中的孢子粉制作孢子悬浮液,孢子悬浮液点滴在虫体上;S4、取步骤S3处理过的试虫放入养虫笼中,每日检查死虫数连续观察,根据处理时间和累计死亡率建立线性回归方程,并计算致死中时间LT50;S5、取步骤S3处理过的试虫用双蒸水冲洗干净后,再用滤纸吸干虫体表面水分放入液氮罐冷冻,再转放至-80℃冰箱中保存待用;检测前于液氮中研磨均匀获得处理样品;S6、取S5步骤的处理样品,加入1%聚乙烯毗咯烷酮,冰浴匀浆并进行离心分离,取上清液为保护酶待测液,通过试剂盒检测保护酶活性;S7、取S5步骤的处理样品,加入磷酸盐缓冲液,冰浴匀浆并进行离心分离,取上清液为解毒酶待测液,通过试剂盒检测解毒酶活性。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 中山火炬职业技术学院 水黄皮真菌对稻褐飞虱的毒力、酶活性检测方法及其应用

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