买专利卖专利找龙图腾，真高效！ 查专利查商标用IPTOP,全免费！专利年费监控用IP管家,真方便！

申请/专利权人：广西农垦永新畜牧集团金光有限公司

摘要：本发明公开了一种检测蛋白质巯基亚硝基化的荧光探针及其制备方法，寻找准确、灵敏、快速和特异性强的蛋白质检测方法为揭示生命奥秘、诊治疾病和筛选药物具有重要意义，蛋白质荧光分析法具有灵敏度高、选择性好、动态响应范围宽和测定条件更接近生命体生理环境的优点，逐渐广泛应用于蛋白质检测，以二甲基酮类似物为受体，设计并合成了一系列针对蛋白质次磺酸的探针，优化并选取CPD作为次磺酸荧光探针进行了相关的测试和活细胞内应用研究，能够在微摩尔水平内使用的荧光探针，对细胞内ROS没有干扰，CPD具有较好的透膜性，且能够在生理体系内应用。

主权项：1.一种检测蛋白质巯基亚硝基化的荧光探针及其制备方法，其特征在于：S1：寻找准确、灵敏、快速和特异性强的蛋白质检测方法为揭示生命奥秘、诊治疾病和筛选药物具有重要意义，蛋白质荧光分析法具有灵敏度高、选择性好、动态响应范围宽和测定条件更接近生命体生理环境的优点，逐渐广泛应用于蛋白质检测，特异性小分子荧光探针一般包括两个部分，一个是荧光团部分，此部分应满足有足够强的光学响应，其荧光信号强度变化只对一种或较少的环境因素敏感等条件；另一个部分是对目标蛋白质具有专一识别能力的特定配体或化学官能团，它与目标蛋白质融合；S2：由于NO调控网络的复杂性和现有研究手段的限制，对SNO的研究还有很多方面有待深入，如蛋白质的亚硝基化去亚硝基化转硝基化的分子反应机理、SNO作用位点选择性、催化机制、调控网络等，而SNO的挑战性和美丽之处在于其短时性的天然属性，它的氧化还原调控能力、作为氧化中间产物以及形成和消失的微妙性；S3：维持蛋白质的正确构象，防止错误折叠蛋白质的聚集，对于植物在逆境胁迫条件下的存活至关重要.分子伴侣和热激蛋白有利于稳定蛋白质和细胞膜系统，促进蛋白质的重新折叠，并防止蛋白质的聚集，多种Cpn和Hsp的S-亚硝基化水平在胁迫条件下发生变化，在经物质的量浓度为250mmol·L－1的GSNO处理后的拟南芥悬浮培养细胞中，Cpn10和Hsp60发生S-亚硝基化修饰；S4：以对氨基亚砷酸为基础，引入乙二硫醇，设计、合成了稳定的相邻巯基受体VTA2，并在此基础上，引入抗光漂白能力较强的荧光团1，8-恭酰亚胺，并在荧光团的4，5位分别连接生物相容性较好的二甘醇胺，合成得到了荧光探针NPE，NPE是第一个报道的能够用于选择性检测细胞内源性相邻巯基的荧光探针，在微摩尔水平无细胞毒性，同时NPE对蛋白质相邻巯基具有很好的选择性，活细胞原位荧光成像实验证实NPE能够通过荧光对细胞内含相邻巯基蛋白进行及时跟踪响应，与商业化的亚细胞器内定位探针共标显示标记的相邻巯基蛋白:主要存在于线粒体内。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 广西农垦永新畜牧集团金光有限公司 一种检测蛋白质巯基亚硝基化的荧光探针及其制备方法