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申请/专利权人：郑州大学
申请日：2024-03-20
公开（公告）日：2024-07-05
公开（公告）号：CN118294355A
主分类号：G01N15/10
分类号：G01N15/10;G01N15/01;G01N21/64
优先权：
专利状态码：在审-实质审查的生效
法律状态：2024.07.23#实质审查的生效;2024.07.05#公开
摘要：本发明属于细胞成像以及药物检测技术领域，具体涉及一种细胞内阿兹夫定的可视化检测方法及检测试剂盒。本发明提供的细胞内阿兹夫定的可视化检测方法及检测试剂盒，运用5‑羧基荧光素炔烃5‑FAM‑Alkyne与阿兹夫定发生点击化学反应，从而构建了一种细胞内阿兹夫定的可视化检测方法以及检测体系。该检测方法是针对细胞内抗病毒核苷药物阿兹夫定的细胞原位荧光成像技术，其反应体系简单，可实现阿兹夫定的快速、准确成像以及定量检测，能够有效解决现有技术中无法特异性检测阿兹夫定在细胞内的蓄积部位及浓度变化情况的技术问题。
主权项：1.一种细胞内阿兹夫定的可视化检测方法，其特征在于，包括以下步骤：对阿兹夫定的待测细胞样品进行洗涤，然后采用固定液固定，再次洗涤后重悬，得到细胞悬液；在细胞悬液中加入下述溶液：浓度为4～6mM的5-羧基荧光素炔烃溶液，浓度为80～120mM的三3-羟丙基三唑甲基胺溶液，浓度为16～24mM的硫酸铜溶液，浓度为240～360mM的抗坏血酸钠溶液；加入后避光孵育以进行可视化荧光反应；避光孵育后洗涤，采用DAPI染液进行染色，然后在荧光下成像，即实现细胞内阿兹夫定的可视化检测；其中，所述可视化检测方法用于分析阿兹夫定药物在细胞内的作用机制、药物的靶向性以及药物的代谢和排泄情况，不用于治疗或诊断目的。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 郑州大学 一种细胞内阿兹夫定的可视化检测方法及检测试剂盒
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