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申请/专利权人：海南大学
申请日：2024-05-11
公开（公告）日：2024-07-05
公开（公告）号：CN118291361A
主分类号：C12N5/04
分类号：C12N5/04
优先权：
专利状态码：在审-实质审查的生效
法律状态：2024.07.23#实质审查的生效;2024.07.05#公开
摘要：本发明公开了一种快速提取水菜花沉水叶原生质体的方法，属于植物分子细胞生物学技术领域，所述快速提取水菜花沉水叶原生质体的方法，包括以下步骤：水菜花沉水叶水洗，切成小叶块，于浸泡于无菌水的状态下，切成叶丝；叶丝与酶解液混合，避光酶解处理，然后加入W5溶液，细胞筛过滤，第一离心处理，得初提物；初提物与W5溶液混合，重悬，第二离心处理，得沉淀，重复处理2～3次，得原生质体粗提物，原生质体粗提物与W5溶液混合，冰上放置20～40min，弃上清，得原生质体，原生质体重悬于MMG溶液中。本发明利用纤维素酶和果胶酶降解细胞壁，并使用山梨醇作为渗透物质，保持了制备所得原生质体的完整性。
主权项：1.一种快速提取水菜花沉水叶原生质体的方法，其特征在于，包括以下步骤：1水菜花沉水叶水洗，切成小叶块，所述小叶块于浸泡于无菌水的状态下，切成叶丝；2步骤1所述叶丝与酶解液混合，避光酶解处理1.5～2h，然后加入W5溶液，细胞筛过滤，滤出液第一离心处理，得初提物；3步骤2所述初提物与W5溶液混合，重悬，第二离心处理，得沉淀；4步骤3所得沉淀按照步骤3重复处理2～3次，得原生质体粗提物，所述原生质体粗提物与W5溶液混合，冰上放置20～40min，弃上清，得原生质体，所述原生质体重悬于MMG溶液中。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 海南大学 一种快速提取水菜花沉水叶原生质体的方法
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