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一种长期保存的短距槽舌兰活体再生并高效扩繁的方法 

申请/专利权人:云南省林业和草原科学院

申请日:2024-04-29

公开(公告)日:2024-06-28

公开(公告)号:CN118104567B

主分类号:A01H4/00

分类号:A01H4/00

优先权:

专利状态码:有效-授权

法律状态:2024.06.28#授权;2024.06.18#实质审查的生效;2024.05.31#公开

摘要:本发明提供一种长期保存的短距槽舌兰活体再生并高效扩繁的方法,涉及植物组织培养技术领域。以种质库保存近二十年的原球茎为离体材料,探索短距槽舌兰种质资源复苏再生,实现快速扩繁的可行性。包括以下步骤:类原球茎的诱导与增殖培养;类原球茎的分化培养;不定芽继代增殖培养;壮苗与生根培养;炼苗与移栽。本发明克服了现有技术的不足,通过对培养基各组分的精简优化,筛选出各阶段的优水平配方,不仅控制成本,更实现了高质量、指数级的高效扩繁。

主权项:1.一种长期保存的短距槽舌兰活体再生并高效扩繁的方法,其特征在于,所述活体再生并高效扩繁的方法包括以下步骤:S1、基础培养基的设置:设置改良MS为基础培养基,其中保持MS培养基的铁盐和有机物含量不变,调整MS培养基的大量元素和微量元素为:KNO3:2400mgL、NH4NO3:1150mgL、CaCl2·2H2O:220mgL、MgSO4·7H2O:370mgL、KH2PO4:340mgL、KI:1.66mgL、H3BO3:12.40mgL、MnSO4·4H2O:44.6mgL、ZnSO4·7H2O:17.20mgL、Na2MoO4·2H2O:0.50mgL、CuSO4·5H2O:0.05mgL、CoCl2·6H2O:0.05mgL;S2、类原球茎诱导与增殖培养:将长期保存的短距槽舌兰的原球茎接种至原球茎培养基中诱导类原球茎体的形成,且设置原球茎培养基为:改良MS+3%蔗糖+0.6~0.8%琼脂+6-BA0.5~2mgL+NAA0.6~1.0mgL+AC0.5~2gL;S3、类原球茎分化培养:将上述诱导得到的类原球茎体转接到分化培养基上继续培养至分化出不定芽,且设置分化培养基为:改良MS+3%蔗糖+0.6~0.8%琼脂+6-BA0.3~0.9mgL+NAA0.3~0.6mgL+AC0.5~2gL+花宝一号0.5~1gL;S4、不定芽继代增殖培养:将上述不定芽转接到继代培养基中进行继代增殖生长,且设置不定芽继代培养基为:N6培养基+4~5%蔗糖+0.6~0.8%琼脂+6-BA0.6mgL+NAA0.1~0.5mgL+AC1.0gL+花宝一号2gL;S5、壮苗与生根培养:将上述继代增殖生长的短距槽舌兰苗转接至生根培养基中,且设置生根培养基为:12MS+3%蔗糖+0.6~0.8%琼脂+IBA0.5~1.0mgL+NAA0.1~0.2mgL+AC0.5~2gL+花宝一号0.5~1gL;S6、炼苗与移栽:将上述生根的短距槽舌兰苗于温室内炼苗一周后清洗处理,后移栽到树皮、椰糠、锯末和水苔基质中。

全文数据:

权利要求:

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