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一种邻氨基苯甲酸合酶突变体及其应用 

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申请/专利权人:杭州欧合生物科技有限公司

摘要:本发明公开了一种大肠杆菌来源邻氨基苯甲酸合酶突变体及其制备方法和应用。所述突变体是将来自链霉菌、肠杆菌、芽孢杆菌的邻氨基苯甲酸合酶中氨基酸序列为TXLLES结构域最后一位突变为甲硫氨酸。该突变体拥有高抗反馈抑制特性,相比于野生型邻氨基苯甲酸合酶和色氨酸的抑制常数Ki提高超过400倍,在此基础上进一步将第94位的丝氨酸突变为天冬酰胺可进一步提高抗反馈性能至野生型的533倍。比目前工业应用中最广泛使用的TrpES40F突变体的抗反馈抑制性能提高了近两倍。此外,本发明构建的邻氨基苯甲酸合酶在pH=6‑9均具有较高催化活性,具有广泛的应用场景。

主权项:1.一种邻氨基苯甲酸合酶突变体,其特征在于,将来自链霉菌、肠杆菌、芽孢杆菌的邻氨基苯甲酸合酶中氨基酸序列为TXLLES结构域最后一位突变为甲硫氨酸;更具体来源于天蓝色链霉菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌,其中X为任意氨基酸;更具体地,其中大肠杆菌来源的邻氨基苯甲酸合酶的第40位、天蓝色链霉菌来源邻氨基苯甲酸合酶第48位、枯草芽孢杆菌来源的邻氨基苯甲酸合酶第48位突变为甲硫氨酸;进一步具体地,对大肠杆菌来源的由核苷酸如SEQIDNO.1所示编码的邻氨基苯甲酸合酶第40位突变为甲硫氨酸;更进一步将第94位的丝氨酸突变为天冬酰胺。

全文数据:

权利要求:

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