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一种快速脱去卵母细胞透明带的方法 

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申请/专利权人:安徽农业大学

摘要:本发明公开了一种快速脱去卵母细胞透明带的方法,所述方法包括以下步骤:制作普通移卵针和尖口移卵针;在进口皿中制作2排DPBS+0.3%PVP液滴和链酶蛋白酶液滴;用普通移卵针吸取一枚哺乳动物卵母细胞或胚胎置于第一排DPBS+0.3%PVP液滴中,按照液滴顺序洗涤,直到洗去细胞表面的残留液体,然后置于链酶蛋白酶液滴中进行消化,至透明带出现形变和扩张,移入第二排其中一个DPBS+0.3%PVP液滴中,用尖口移卵针摁住透明带扩张的地方,并进行缓慢反复的吸吹,直到透明带脱落,再转移到第二排剩下的两个DPBS+0.3%PVP液滴中洗净即可。本发明使用特制的尖口移卵针在蛋白酶消化的辅助下去掉透明带的方法,高效快速,且对卵母细胞质量影响更小。

主权项:1.一种快速脱去卵母细胞透明带的方法,其特征在于,包括以下步骤:1制作普通移卵针;2尖口移卵针的制作:利用磨针仪对普通移卵针进行磨针,得到尖口移卵针,磨好的尖口移卵针斜切口的角度为45°;3制备DPBS+0.3%PVP和链酶蛋白酶,在进口皿中制作2排DPBS+0.3%PVP液滴,每排3滴,每滴50μL-100μL,在离心管中加入1mgml的链酶蛋白酶,再加DPBS+0.3%PVP溶液,吹打混匀并瞬时离心,取离心管中上层稀释过的链酶蛋白酶溶液,在进口皿中制作一个链酶蛋白酶液滴;4卵母细胞透明带的去除:用普通移卵针吸取一枚哺乳动物卵母细胞或胚胎置于第一排DPBS+0.3%PVP液滴中,按照液滴顺序洗涤,直到洗去细胞表面的残留液体,然后置于链酶蛋白酶液滴中进行消化,至透明带出现形变和扩张,移入第二排其中一个DPBS+0.3%PVP液滴中,用尖口移卵针摁住透明带扩张的地方,并进行缓慢反复的吸吹,直到透明带脱落,再转移到第二排剩下的两个DPBS+0.3%PVP液滴中洗净即可。

全文数据:

权利要求:

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