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申请/专利权人：中国水产科学研究院东海水产研究所
摘要：本发明涉及一种用于青海湖裸鲤肠道单细胞水平NKA蛋白染色的方法，包括取组织、酶解、制备肠道单细胞悬液、NKA染色。本发明能够实现低成本、快速、高效获得青海湖裸鲤肠道单细胞悬液，并保证解离的细胞保持良好活力，可应用于为其他鱼类细胞的解离、分离纯化以及细胞系的建立，为青海湖裸鲤的单细胞、基因功能研究提供重要参考资料。
主权项：1.一种用于青海湖裸鲤肠道单细胞水平NKA蛋白染色的方法，包括：1取青海湖裸鲤肠道新鲜组织，冲洗，然后放入含D-PBS缓冲液的离心管中离心，随后加入肠道组织消化酶混合液酶解消化，得到组织消化液；其中，所述肠道组织消化酶混合液组成为：0.1-0.5mgml胶原酶Ⅰ、0.04-0.08mgml胶原酶Ⅱ和0.1-0.5mgml胶原酶Ⅳ，溶剂为D-PBS缓冲液；2将步骤1得到的组织消化液过滤、离心、重悬，得到肠道单细胞悬液；3将步骤2得到的肠道单细胞悬液滴加到载玻片上，待沉降吸走细胞悬液，随后固定、封闭肠道单细胞，分别加入NKA一抗、二抗染色，最后荧光显微镜拍照即可；其中，所述NKA一抗抗体稀释比为1:100，NKA二抗抗体稀释比为1:400。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 中国水产科学研究院东海水产研究所 一种用于青海湖裸鲤肠道单细胞水平NKA蛋白染色的方法
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