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一种嗜水气单胞菌诱导乌鳢肠道炎症模型的构建方法和应用 

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申请/专利权人:吉林农业大学

摘要:本发明公开了一种嗜水气单胞菌诱导乌鳢肠道炎症模型的构建方法和应用,包括:将大小相似、健康无病的乌鳢随机分为若干组,每组三个重复,将0.1mL不同浓度的嗜水气单胞菌菌液或等量PBS溶液肛灌注入乌鳢肠道,24h后,得到24h嗜水气单胞菌诱导乌鳢肠道模型;观察和测定24h嗜水气单胞菌诱导乌鳢肠道模型的存活率、肠道临床症状、肠道组织病理学、肠道通透性酶活、肠道免疫酶活和肠道免疫基因表达指标,综合各指标确定嗜水气单胞菌诱导乌鳢肠道模型的最适剂量,以最适剂量的嗜水气单胞菌菌液肛灌注入乌鳢肠道得到的乌鳢作为嗜水气单胞菌诱导乌鳢肠道炎症模型,为了解乌鳢肠道炎症机制提供方向和思路。

主权项:1.一种嗜水气单胞菌诱导乌鳢肠道炎症模型的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤1:将大小相似、健康无病的乌鳢随机分为若干组,每组三个重复,将0.1mL不同浓度的嗜水气单胞菌菌液或等量PBS溶液肛灌注入乌鳢肠道,24h后,得到24h嗜水气单胞菌诱导乌鳢肠道模型;步骤2:观察和测定所述24h嗜水气单胞菌诱导乌鳢肠道模型的如下指标:存活率、肠道临床症状、肠道组织病理学、肠道通透性酶活、肠道免疫酶活和肠道免疫基因表达,包括:观察各组间乌鳢死亡情况;观察不同组乌鳢泄殖孔和肠道末端红肿情况;尾静脉抽取乌鳢血液在4℃下放置12h后获得血清样品,测定血清免疫相关酶活;取不同组乌鳢肠道固定于4%福尔马林溶液制作HE染色组织切片,观察病理变化;取不同组乌鳢肠道在液氮中快速冷冻后获得肠道样本,测定肠道免疫相关酶活和基因表达水平;步骤3:综合步骤2中各项指标确定嗜水气单胞菌诱导乌鳢肠道模型的最适剂量,以所述最适剂量的嗜水气单胞菌菌液肛灌注入乌鳢肠道得到的乌鳢作为嗜水气单胞菌诱导乌鳢肠道炎症模型。

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