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申请/专利权人：广州市食品检验所(广州市酒类检测中心)

摘要：本发明提出一种曼氏迭宫绦虫裂头蚴LAMP恒温快速检测方法，步骤有：1、准备待测DNA样品及LAMP恒温扩增特异性引物；其中LAMP恒温扩增特异性引物是选取曼氏迭宫绦虫裂头蚴基因序列进行合成得到，该基因序列采用曼氏迭宫绦虫裂头蚴GST基因核苷酸序列；所述LAMP恒温扩增特异性引物为：外引物F3、外引物B3、内引物FIB、内引物BIP、环引物LF、环引物LB；2、采用LAMP恒温扩增反应体系对待测DNA样品进行LAMP恒温扩增，检测扩增产物的荧光信号，得到检测结果。本发明对曼氏迭宫绦虫裂头蚴特异性好、灵敏度高，可用于食品中曼氏迭宫绦虫裂头蚴的快速检测。

主权项：1.曼氏迭宫绦虫裂头蚴LAMP恒温快速检测方法，其特征在于包括有以下步骤：步骤1、准备待测DNA样品，以及准备对待测DNA样品进行LAMP恒温扩增的LAMP恒温扩增特异性引物；所述待测DNA样品经超微量分光光度计测定后，其A260A280在1.7-2.0之间，DNA浓度＞10ngμL，于-20℃保存备用；所述LAMP恒温扩增特异性引物是选取曼氏迭宫绦虫裂头蚴特异性基因序列进行合成得到，所述曼氏迭宫绦虫裂头蚴基因采用：曼氏迭宫绦虫SpirometramansoniGST基因；所述特异性基因序列在曼氏迭宫绦虫裂头蚴GST基因中第191bp-405bp位置；所述LAMP恒温扩增特异性引物为：外引物F3：5’-GGGAAAAGCATGGTCTTGGA-3’外引物B3：5’-GTTGTCACCCATTAGCCACT-3’内引物FIB：5’-CGGCTTAGACCAGTTCGCAAGTGCAAAGGAACAGGCTGAGAT-3’内引物BIP：5’-ACAAAGAAGAGCGGCCTAGCTTTCGCCGAGGTAATTGGAAAT-3’环引物LF：5’-GCAGCCTCTGCCATAGCA-3’环引物LB：5’-ATGCCCACATTTGAAAAGGGCATTG-3’步骤2、采用LAMP恒温扩增反应体系，对待测DNA样品进行LAMP恒温扩增，检测扩增产物的荧光信号，得到检测结果；其中，所述LAMP恒温扩增反应体系包括有所述LAMP恒温扩增特异性引物。

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