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申请/专利权人：中国热带农业科学院环境与植物保护研究所
摘要：本发明公开了一种用于椰心叶甲、水椰八角铁甲和海枣异胸潜甲的快速鉴定方法，属于分子生物技术领域，针对椰心叶甲、水椰八角铁甲和海枣异胸潜甲三种形态比较相似且危害棕榈科植物的食叶甲虫提供了一套快速鉴定的专用引物及其使用方法。本发明设计的三对特异性引物不仅可以用来分别鉴定椰心叶甲、水椰八角铁甲和海枣异胸潜甲，使之能准确而快速地鉴别这三种食叶甲虫，而且将这三对特异性引物混合在一起，分别以椰心叶甲、水椰八角铁甲和海枣异胸潜甲的基因组DNA为模板进行PCR反应，也能鉴定出三种不同的食叶甲虫。该操作简便快捷，具有广泛的适用性。因此，本发明为椰心叶甲、水椰八角铁甲和海枣异胸潜甲的防治与检疫提供了重要的方法。
主权项：1.一种用于椰心叶甲、水椰八角铁甲和海枣异胸潜甲的快速鉴定方法，其特征在于，包括以下步骤：1PCR扩增：用特异性引物BL-FGT-R、ON-FGT-R、JP-FGT-R中的一种或几种对食叶甲虫样品DNA进行PCR扩增，得到PCR产物反应液；BL-F核苷酸序列:GCATCGCCGTCTCAAGAA；GT-R核苷酸序列:CAAGGTTTCCGTAGGTGA；ON-F核苷酸序列:GCGTTCAACTAATGTACC；GT-R核苷酸序列:CAAGGTTTCCGTAGGTGA；JP-F核苷酸序列:ATGTGTGTGTTGTTCGGTC；GT-R核苷酸序列:CAAGGTTTCCGTAGGTGA；2将步骤1所得的PCR产物反应液进行电泳分析；3根据电泳显示的PCR扩增片段的大小来判断棕榈食叶甲虫种类，若有明显清晰的628bp的条带，则可判断为是椰心叶甲，若条带为954bp的为水椰八角铁甲，若条带为222bp的则为海枣异胸潜甲。
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