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申请/专利权人：华东师范大学;无锡华诺威动物保健品有限公司
摘要：本发明公开了一种pnpla2基因缺失斑马鱼突变体的制备方法及其应用，涉及分子生物学技术领域。包括如下步骤：1构建针对pnpla2基因特异的CRISPR‑Cas9的靶序列，并设计靶位点gRNA；2将敲除斑马鱼pnpla2基因的靶位点gRNA和Cas9蛋白共同注射到斑马鱼胚胎中，获得pnpla2基因缺陷型突变体。本发明首次在斑马鱼中利用CRISPR‑Cas9技术获得pnpla2基因缺失突变体，形成可以稳定遗传的突变体品系；构建的斑马鱼pnpla2基因缺失突变体能用于培养获得肌纤维直径细、肌肉脂质积累的斑马鱼，为斑马鱼的遗传育种奠定基础；与野生型斑马鱼相比，突变型斑马鱼的肌肉脂质和脂肪酸组成发生显著变化，其中，肌肉甘油三酯的比例显著增加，亚麻酸18:3ω‑3、EPA20:5n‑3、DHA22:6等多不饱和脂肪酸的比例均显著增加。
主权项：1.一种pnpla2基因缺失斑马鱼突变体的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：1构建针对pnpla2基因特异的CRISPR-Cas9的靶序列，并设计靶位点gRNA；2将敲除斑马鱼pnpla2基因的靶位点gRNA和Cas9蛋白共同注射到斑马鱼胚胎中，获得pnpla2基因缺陷型突变体。
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百度查询： 华东师范大学 无锡华诺威动物保健品有限公司 一种pnpla2基因缺失斑马鱼突变体的制备方法及其应用
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