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摘要:本发明涉及生物医药领域,特别涉及人乳头瘤病毒L1蛋白纯化和VLP组装的方法。本发明在人乳头瘤病毒L1蛋白纯化时,使其吸附在层析介质上阳离子交换介质、阴离子交换介质,再用不含还原剂DTT或β‑巯基乙醇的缓冲液进行预洗,然后再用不含还原剂的洗脱缓冲液洗脱介质上的L1蛋白,最后在洗脱的L1蛋白中补加组装VLP需要的盐类,并调整至合适的离子浓度、pH值等,于4℃静置30min即可形成VLP,且形成的VLP粒径分布均一,电镜观察形成的VLP颗粒完整、结构紧密。
主权项:1.人乳头瘤病毒L1蛋白纯化和VLP组装的方法,其特征在于,取表达重组HPVL1的细胞经破碎、离心、盐析、重悬解聚后,层析纯化,重组装;所述层析纯化的平衡、预洗、洗脱过程中,均不添加还原剂;所述重组装具体为:在洗脱的L1蛋白中补加组装VLP需要的盐类或表面活性剂中的一种或多种,并调整至合适的离子浓度、pH值,于4℃组装30min,获得VLP。
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百度查询: 长春卓谊生物股份有限公司 人乳头瘤病毒L1蛋白纯化和VLP组装的方法
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