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摘要:本发明提供一种利用细叶远志快速组培扩繁成苗的方法,包括:S1,采用升汞溶液对细叶远志种子或细叶远志外植体进行消毒3~5次,每次消毒时间为1~3min,消毒完成后,用无菌水清洗并干燥,将干燥的细叶远志种子或细叶远志外植体放置于培养基上培养,获得无菌苗或无菌细叶远志外植体;S2,将无菌苗或无菌细叶远志外植体置于诱芽培养基上培养,得到丛生芽;S3,将丛生芽接种到生根培养基中培养,得到生根幼苗;S4,生根幼苗移植到土壤。本发明采用升汞溶液每次短时间消毒,消毒多次的方法,较常规一次长时间的消毒方法,大大减少了升汞对细叶远志种子或远细叶志外植体活力的损伤,从而一定程度上降低了组培苗的生产成本。
主权项:1.一种利用细叶远志快速组培扩繁成苗的方法,其特征在于,包括如下步骤:S1,采用0.1%升汞溶液对细叶远志种子进行消毒3~5次,每次消毒时间为1~3min,消毒完成后,用无菌水清洗并向清洗后的细叶远志种子中加入无水乙醇,加入无水乙醇后部分细叶远志种子沉于无水乙醇底部,部分细叶远志种子浮在无水乙醇上层,将浮在无水乙醇上层的细叶远志种子和无水乙醇去除,将沉于无水乙醇底部的细叶远志种子干燥,将干燥的细叶远志种子放置于改良12MS培养基上培养,获得无菌苗;或者,采用0.1%升汞溶液对细叶远志茎段进行消毒3~5次,每次消毒时间为1~3min,消毒完成后,用无菌水清洗并干燥,得到无菌细叶远志茎段;S2,将无菌苗或无菌细叶远志茎段置于诱芽培养基上培养,得到丛生芽;其中,所述诱芽培养基配方为改良12MS培养基,添加1~2mgLZR和10gL蔗糖;S3,将丛生芽接种到生根培养基中培养,得到生根幼苗;其中,所述生根培养基为改良12MS培养基添加0.5~1mgLNAA、1~2mgLIBA和3.33~5gL蔗糖;S4,生根幼苗移植到土壤;其中,所述改良12MS培养基组分包括:1300~1500mgL硝酸钾、190~220mgL磷酸二氢钾、130~150mgL硫酸镁、200~240mgL氯化钙、1200~1400mgL尿素和20~30gL蔗糖,不包括硝酸铵;S1中,加入无水乙醇至去除无水乙醇两操作之间的间隔时间为20~60s。
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