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一种体外获得后脑底板细胞的方法、成套培养基及应用 

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申请/专利权人:同济大学

摘要:本发明公开了一种体外获得后脑底板细胞的方法、成套培养基及应用,方法包括:S1、单层贴壁培养未分化的胚胎干细胞;S2、第0天在NIM培养基中加入TGFbetaWntNodal信号通路抑制剂、BMP信号通路拮抗剂;S3、第1天,在NIM培养基中加入TGFbetaWntNodal信号通路抑制剂、BMP信号通路拮抗剂、Hedgehog信号通路Smoothened蛋白激动剂、homeobox基因激动剂;S4、第5天,在NIM培养基中加入BMP信号通路拮抗剂、Hedgehog信号通路Smoothened蛋白激动剂、homeobox基因激动剂;S5、在分化第7天,在NIM培养基中加入BMP信号通路拮抗剂、homeobox基因激动剂;S6、继续培养,直至分化成后脑底板细胞;本发明提供一种分化效率高、且分化时间快的体外获得后脑底板细胞的方法、成套培养基及应用,且分化的后脑底板细胞可功能性分泌SHH蛋白。

主权项:1.一种体外获得后脑底板细胞的方法,其特征在于,包括以下步骤:S1、单层贴壁培养未分化的胚胎干细胞;S2、在分化第0天在NIM培养基中加入TGFbetaWntNodal信号通路抑制剂、BMP信号通路拮抗剂;S3、在分化第1天,更换培养基,在NIM培养基中加入TGFbetaWntNodal信号通路抑制剂、BMP信号通路拮抗剂、Hedgehog信号通路Smoothened蛋白激动剂、homeobox基因激动剂;S4、在分化第5天,更换培养基,在NIM培养基中加入BMP信号通路拮抗剂、Hedgehog信号通路Smoothened蛋白激动剂、homeobox基因激动剂;S5、在分化第7天,更换培养基,在NIM培养基中加入BMP信号通路拮抗剂、homeobox基因激动剂;S6、继续培养,直至分化成后脑底板细胞;所述homeobox基因激动剂包括Retinoicacid。

全文数据:

权利要求:

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