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申请/专利权人:云南农业大学
摘要:本发明涉及一种带有GFP基因的重楼花叶坏死病毒侵染性克隆载体及其构建方法,属于植物病毒学和基因工程领域。本发明中带GFP基因的重楼花叶坏死病毒侵染性克隆载体,是利用酵母重组的方法,将PMNV全基因组RNA对应的cDNA全长序列克隆至pCB301‑HDV‑2µ载体的双35S启动子和终止子NOS之间,并把绿色荧光蛋白报告基因插入到PMNV的NIb蛋白和CP蛋白之间,即获得pCB301‑PMNV‑GFP重组载体。本发明利用酵母同源重组技术构建的PMNV侵染性克隆载体是重楼上植物病毒的第一个侵染性克隆,本发明中构建的pCB301‑PMNV‑GFP载体能稳定高效系统侵染模式植物本生烟,并在本生烟体内高效表达GFP。
主权项:1.一种带有GFP基因的重楼花叶坏死病毒侵染性克隆载体,其特征在于,所述侵染性克隆载体是利用酵母重组将PMNV全基因组RNA对应的cDNA全长序列克隆至pCB301-HDV-2μ载体的双35S启动子和终止子NOS之间,并把绿色荧光蛋白报告基因插入到PMNV的NIb蛋白和CP蛋白之间,同时在mGFP序列的两端加入TYEVHHQ酶切位点,即获得pCB301-PMNV-GFP重组载体;所述PMNV序列如:SEQIDNO:1所示。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 云南农业大学 带有GFP基因的重楼花叶坏死病毒侵染性克隆载体及其构建方法
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