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一种胎盘分离提取蜕膜干细胞的方法 

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申请/专利权人:深圳润生元生物科技有限公司

摘要:一种胎盘分离提取蜕膜干细胞的方法,包括步骤一,胎盘收集预处理;步骤二,剥离蜕膜并清洗;步骤三,一次酶解消化;步骤四,一次离心;步骤五,二次酶解消化;步骤六,二次离心;步骤七,接种培养;所述步骤四中,离心机的运转速度设置为1000rmin,离心持续时间为5min;所述步骤五中,二次酶解使用1gL的胶原酶进行消化,酶解消化时间为60min;本发明通过胰蛋白酶和胶原酶的二次酶解方案,使得胎盘蜕膜干细胞的提取效率大大提高,通过在酶解过程中添加培养液,提供更加合适的酶解环境,使得提取的干细胞活性较高,另外通过二次离心方案,避免了在多次离心过程中损伤蜕膜干细胞。

主权项:1.一种胎盘分离提取蜕膜干细胞的方法,包括步骤一,胎盘收集预处理;步骤二,剥离蜕膜并清洗;步骤三,一次酶解消化;步骤四,一次离心;步骤五,二次酶解消化;步骤六,二次离心;步骤七,接种培养;其特征在于:其中在上述步骤一中,采集胎盘,并保存于对应保存液中,进行提取前预处理;其中在上述步骤二中,将胎盘上的蜕膜剥离,使用清洗液进行清洗,并将蜕膜剪碎;其中在上述步骤三中,加入培养液,对蜕膜组织进行一次酶解消化,得到细胞液;其中在上述步骤四中,将细胞液转移到离心管内,加入清洗液,打开低温离心机,配平后将细胞液进行一次离心,沉淀后弃上清液;其中在上述步骤五中,往步骤四中的细胞液加入培养液,进行二次酶解;其中在上述步骤六中,酶解后加入清洗液进行二次离心,弃上清液,过细胞筛网过滤;其中在上述步骤七中,将细胞液转移至培养基中,加入培养液进行培养。

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权利要求:

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