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一种堇叶碎米荠叶片组培再生体系的建立方法 

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申请/专利权人:长江大学

摘要:本发明公开了一种堇叶碎米荠叶片组培再生体系的建立方法,以及一种用于堇叶碎米荠的组培培养基及其应用。采用堇叶碎米荠叶片作为外植体,将叶片清洗灭菌后接种到诱导培养基中诱导15~20d得到愈伤组织,接着转移到分化培养基中培养20~25d,将1~3cm高的芽转移至生根培养基中生长15~20d诱导生根形成完整植株,将其移栽即可。通过上述方法建立的堇叶碎米荠叶片组培再生体系能够高效地获得堇叶碎米荠外植体再生苗,可为构建堇叶碎米荠遗传转化体系奠定基础,并为堇叶碎米荠优良品种培育繁殖提供技术参考,适合在生物技术领域推广利用。

主权项:1.一种堇叶碎米荠叶片组培再生体系的建立方法,其特征在于,主要包括以下步骤:1外植体消毒:选择堇叶碎米荠幼嫩叶片作为外植体,自来水冲洗后在超净工作台中先用乙醇消毒,再用无菌水冲洗、次氯酸钠消毒、无菌水冲洗;2愈伤组织诱导:将步骤1中处理的叶片用无菌解剖刀切成1cm×1cm的小块;将叶片正面向上接种到诱导培养基中光照培养15~20d得到愈伤组织;3分化培养:将步骤2中获得的愈伤组织转移至分化培养基中光照培养20~25d,培养出堇叶碎米荠不定芽;4生根培养:将步骤3中获得的丛生不定芽切成单株,待其长至1~3cm高同时具有三到五片叶子的芽时,转移至生根培养基中光照培养15~20d诱导生根,培养出堇叶碎米荠无菌再生苗;5炼苗移栽:待步骤4堇叶碎米荠无菌再生苗长至8~10cm时,转移到蛭石和珍珠岩组成的基质中,覆盖保鲜膜保湿,14天后去除保鲜膜,即完成堇叶碎米荠叶片组培再生体系的建立。

全文数据:

权利要求:

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