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申请/专利权人：江南大学
摘要：本发明公开了一种理性设计提升腈水解酶活性的方法及应用，属于酶工程领域。本发明通过腈水解酶的晶体结构进行分析，通过底物对接确定了催化口袋附近与催化活性相关的位点，对每个点做饱和突变后，通过两种计算方法Rosetta‑Cartesian和FEP对获得的突变体进行稳定性和结合自由能分析，对满足要求的突变体做酶活测定。将单点突变酶活高于野生型的位点进行组合突变再进行计算，最终获得符合要求的突变体进行酶活测定。通过这种方法我们最后获得了两个单点突变体，比酶活为野生型的2、1.5倍，组合突变体F64YW170G比酶活为野生型的4.56倍。
主权项：1.一种腈水解酶突变体，其特征在于，所述突变体是将氨基酸序列SEQIDNO.1的第64位的苯丙氨酸氨酸突变成酪氨酸，将第170位的蛋氨酸突变成甘氨酸。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 江南大学 一种理性设计提升腈水解酶活性的方法及应用
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