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一种朱顶红胚珠试管授粉受精的方法 

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申请/专利权人:沈阳大学

摘要:本发明提供一种朱顶红胚珠离体试管授粉受精的方法。其工艺步骤包括:朱顶红父本透色花蕾灭菌,取未散粉花药于无菌烧杯内干燥散粉。收集无菌花粉,4℃低温处理3d。当天开放的朱顶红母本的子房,灭菌后分离心皮并充分暴露胚珠,接种于固、液双层培养基,大量撒播无菌花粉,不透气封口膜封口,完全黑暗培养3d。分离胚珠并转接于固体MS培养基中,半透膜封口,完全黑暗培养45~60d。筛选受精胚珠并移入于光下培养30d。杂种合子胚萌发,最终获得杂种后代。本发明首次通过试管受精技术获得朱顶红的杂交种,方法简单易行,可有效克服朱顶红远缘杂交及和部分品种自交的受精前障碍,为朱顶红杂交育种提供技术支持。

主权项:1.一种朱顶红胚珠试管授粉受精的方法,其特征在于:朱顶红充分透色花蕾于5%次氯酸钠浸泡10min,剥开花蕾取未散粉花药,无菌吸水纸吸干花药表面水分并移入无菌烧杯内,半透膜封口,于硅胶干燥器内24~48h散粉,收集干燥花粉,4℃低温处理3d;取当天开放朱顶红的子房,5%次氯酸钠灭菌后,使用锋利的无菌解剖刀切除部分子房外壁,纵向切割分离心皮,充分暴露胚珠,将子房外植体接种于固、液双层培养基,将无菌花粉撒播于胚珠表面,不透气封口膜封口,25±2℃下完全黑暗培养3d,逐个分离胚珠并转接于固体培养基MS+30g蔗糖+7.5g琼脂,半透膜封口,黑暗条件下培养;离体授粉后,胚珠继续培养45~60d,可见合子胚,将受精胚珠移入光照条件下培养,每天16h光照,8h黑暗,光强36μmol·m-2·s-1,继续培养30d后,合子胚萌发,并最终获得杂种后代。

全文数据:

权利要求:

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