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一种用于包涵体蛋白复性的复性缓冲液以及方法 

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申请/专利权人:天津鸿宇泰生物科技有限公司

摘要:本申请涉及用于包涵体蛋白复性的复性缓冲液以及方法。所述复性缓冲液包括20~50mM的Tris‑HCl,50~150mM的NaCl,0.5~1.5M的L‑精氨酸,0.5~1wt%的β‑环状糊精和0.05~5wt%的去污剂,且pH值为8~9。本申请所述复性缓冲液中同时包括β‑环状糊精和去污剂,二者能够发挥协同作用,进而使得利用所述复性缓冲液对包涵体进行蛋白复性时能够显著提高包涵体的复性效果,更利于变性蛋白质折叠为天然活性蛋白质。另外,利用所述复性缓冲液对包涵体进行复性的操作简单,成本低,重组蛋白产量高。

主权项:1.一种包涵体蛋白复性的方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:S1,诱导目的蛋白在宿主细胞中表达,然后裂解宿主细胞获得目的蛋白的包涵体;S2,对所述目的蛋白的包涵体进行洗涤和溶解后,获得目的蛋白的包涵体溶液;S3,将所述目的蛋白的包涵体溶液与复性缓冲液混合后,对所述目的蛋白的包涵体进行蛋白复性,获得复性后的目的蛋白;所述目的蛋白为C-反应蛋白;所述复性缓冲液由以下组分组成:20~50mM的Tris-HCl,50~150mM的NaCl,0.5~1.5M的L-精氨酸,0.7wt%~0.9wt%的β-环状糊精和2wt%~4wt%的去污剂,且pH值为8~9;所述去污剂为十二烷基肌氨酸钠和TritonX-100的混合物,且所述十二烷基肌氨酸钠和TritonX-100的质量比为1:2。

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权利要求:

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