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申请/专利权人：贵州省植物园(贵州省园林科学研究所、贵州省植物研究所)

摘要：本发明公开了一种辐花苣苔组织培养快繁方法，涉及辐花苣苔繁殖相关领域，为解决现有技术中的对原产苦苣苔科植物的研究相对缺乏，没有一个具体的对于珍稀濒危植物辐花苣苔的组织培养技术，辐花苣苔野外居群数量极少的问题。包括如下步骤：S1：外植体的处理与消毒灭菌；S2：愈伤组织培养；将灭菌后的叶片接种至愈伤组织培养基中，进行愈伤组织培养；S3：不定芽诱导培养；将获得的愈伤组织接种至诱导不定芽培养基中，进行不定芽诱导培养；S4：壮苗与生根培养；将获得的不定芽接入壮苗与生根培养培养基中，进行壮苗与生根培养；S5：练苗移栽。

主权项：1.一种辐花苣苔组织培养快繁方法，其特征在于，包括如下步骤：S1：外植体的处理与消毒灭菌；将剪下的嫩叶用加有适量洗涤剂的自来水洗净，再用流水冲洗30min，去除外植体表面的杂质，在超净台进行灭菌处理，用75%乙醇消毒20s，消毒后用无菌水清洗３次，再用0.1%升汞浸泡消毒5min，消毒后用无菌水清洗5次，用无菌滤纸吸干外植体表面水分，后将嫩叶剪为1cm×1cm的方块，放入培养基；S2：愈伤组织培养；将灭菌后的叶片接种至愈伤组织培养基中，进行愈伤组织培养；所述愈伤组织培养基为包括以下浓度组分的12MS培养基：4.0mgL6-BA、20gL蔗糖和5.0gL琼脂；所述愈伤组织培养基的pH值为5.7；S3：不定芽诱导培养；将获得的愈伤组织接种至诱导不定芽培养基中，进行不定芽诱导培养；所述诱导不定芽培养基为包括以下浓度组分的12MS培养基：4.0mgL6-BA、0.1mgLNAA、20gL蔗糖和5.0gL琼脂；所述诱导不定芽培养基的pH值为5.7；S4：壮苗与生根培养；将获得的不定芽接入壮苗与生根培养基中，进行壮苗与生根培养；所述壮苗与生根培养基为包括以下浓度组分的12MS培养基、4.0mgL6-BA、0.2mgLNAA、0.1mgLIBA、20gL蔗糖、5.0gL琼脂和1.0gL活性炭；或壮苗与生根培养基为包括以下浓度组分的12White培养基、4.0mgL6-BA、0.2mgLNAA、0.1mgLIBA、20gL蔗糖、5.0gL琼脂和1.0gL活性炭；或壮苗与生根培养基为包括以下浓度组分的12White培养基、4.0mgL6-BA、0.2mgLNAA、0.5mgLIBA、20gL蔗糖、5.0gL琼脂和1.0gL活性炭；所述壮苗与生根培养基的pH值为5.7；S5：炼苗移栽；选取长势、根系良好的组培瓶苗，打开瓶盖放置在自然环境下，7d后在温室中进行炼苗移栽，将组培瓶苗从培养瓶中取出，用流水洗净根部残留培养基，移栽到装有基质的育苗盘中，在室内自然条件下驯化培养；所述育苗盘中基质采用草炭：蛭石：珍珠岩＝1：1：1。

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