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一种检测IRES活性的环RNA荧光素酶报告质粒构建方法 

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申请/专利权人:中山大学附属第一医院

摘要:本发明属于生物医药领域,涉及一种检测IRES活性的环状RNA荧光素酶报告质粒构建方法。本发明提供了一种环状RNA报告质粒的制备方法,包括,将原始报告基因的核酸片段序列拆分成两段序列,分别为5’端起始的一段序列、及报告基因3’端截止的一段序列,将两段序列的位置倒置;所述倒置是指,报告基因5’端起始的一段序列,倒置后的位置位于所述报告基因3’端截止的一段序列的下游;所述报告基因5’端起始的一段序列,始于报告基因5’端,截止于报告基因3’端之前,并且,该截止位点后的下一位即为报告基因3’端截止的一段序列的起始位点。本发明设计的这种环状RNA报告质粒用于检测IRES活性时,能避免由于IRES潜在的启动子活性带来的假阳性,从而实现更客观的IRES活性的定量检测。无需设置额外的对照即可排除,提供一种全新的检测IRES活性的思路。

主权项:1.一种核酸片段序列,其特征在于,所述核酸片段序列如SEQIDNO:1所示。

全文数据:

权利要求:

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