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申请/专利权人:武汉翼康基因科技有限公司
摘要:本发明涉及分子生物学技术领域,尤其涉及一种NMD荧光报告载体系统及其构建方法与应用。其技术方案包括:包含pcNMD‑EGFP荧光报告载体和pcNMD‑mCherry荧光报告载体,所述pcNMD‑EGFP荧光报告载体和pcNMD‑mCherry荧光报告载体是由载体pcMINI改造而成,所述pcNMD‑EGFP荧光报告载体和pcNMD‑mCherry荧光报告载体包含CMV增强子、pCMV启动子、外显子A‑内含子A基因片段、MCS1、pcNMD‑EGFP或pcNMD‑mCherry、MCS2和含正常终止密码子的内含子B‑外显子B基因片段。本发明通过的NMD报告载体系统只需通过更换插入的DNA片段即可实现对不同基因的PTC突变的检测,使用范围广,操作简便;构建的NMD报告载体所需插入的DNA片段小,载体构建更为高效快速;本发明提供了一套完整可行的基于NMD荧光报告载体系统的真核生物基因无义突变导致mRNA降解NMD的验证方法。
主权项:1.一种pcNMD荧光载体系统,其特征在于,包含pcNMD-EGFP荧光报告载体和pcNMD-mCherry荧光报告载体,所述pcNMD-EGFP荧光报告载体和pcNMD-mCherry荧光报告载体是由载体pcMINI改造而成,所述pcNMD-EGFP荧光报告载体和pcNMD-mCherry荧光报告载体包含CMV增强子、pCMV启动子、外显子A-内含子A基因片段、多克隆位点1、pcNMD-EGFP或pcNMD-mCherry、多克隆位点2和含正常终止密码子的内含子B-外显子B基因片段,pcNMD-EGFP用于表达PTC突变型基因序列,pcNMD-mCherry用于表达未突变的野生型基因序列,所述多克隆位点1和多克隆位点2用于在荧光基因前后插入PTC突变附近的编码序列。
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百度查询: 武汉翼康基因科技有限公司 一种NMD荧光报告载体系统及其构建方法与应用
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