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申请/专利权人:中国医学科学院北京协和医院
摘要:本发明提供了一种链格孢霉主要致敏组分重组Alta1的制备方法及应用,其设计全长拼接引物,在引物的两端各设计了保护性碱基合成基因Alta1,连入载体pCZN1的NdeI和XbaI位点之间;其次,将获得的重组质粒pCZN1‑Alta1转入Top10克隆菌株,挑取阳性克隆子测序;再将pCZN1‑Alta1载体导入大肠杆菌中,以IPTG诱导以pCZN1‑Alta1为载体的融合蛋白表达。本发明提供的方法,操作方便、成本低、周期短、表达产量高,且大肠杆菌系统无法对蛋白质进行糖基化修饰,有效的避免了在过敏原组分的表达中,因糖基化引起的检测结果的假阳性问题。
主权项:1.一种链格孢霉主要致敏组分重组Alta1的制备方法,其设计全长拼接引物,在引物的两端各设计了保护性碱基,并合成基因Alta1,其序列如SEQIDNO.1所示,将该基因序列连入载体pCZN1的NdeI和XbaI位点之间,获得重组质粒pCZN1-Alta1;其次,将获得的重组质粒pCZN1-Alta1转入Top10克隆菌株,挑取阳性克隆子测序;再将pCZN1-Alta1载体导入大肠杆菌中,以IPTG诱导以pCZN1-Alta1为载体的融合蛋白表达。
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百度查询: 中国医学科学院北京协和医院 一种链格孢霉主要致敏组分重组Alt a 1的制备方法及应用
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