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申请/专利权人：贵州大学
摘要：本发明公开了一种分离纯化蝉拟青霉5704s菌丝体中HEA的方法，步骤：以蝉拟青霉5704s菌丝体为原料超微粉碎；按照液料比为50:1往超微粉中加70%甲醇、超声提取两次合并提取液；提取液浓缩去醇，冷沉过夜，取上清过滤清亮，上大孔树脂柱，水洗去杂，乙醇洗脱后浓缩成浸膏，超声溶解，过滤，过酸性氧化铝柱脱色并用甲醇洗脱，浓缩蒸干，加甲醇超声溶解，过微滤膜后过半制备液相色谱，有机相为甲醇，水相为水，梯度洗脱，收集目的色谱峰，浓缩后真空干燥，得N6‑（2‑羟乙基）腺苷，其纯度达99%以上。本发明简单可行，重复性好，能够提高天然产物的利用效益，为其今后在工业上的扩大化生产提供理论依据。
主权项：1.一种分离纯化蝉拟青霉5704s菌丝体中HEA的方法，其特征在于：包括以下步骤：（1）取烘干的蝉拟青霉5704s菌丝体为原料，放入超微粉碎机中进行超微粉碎，过筛得到超微粉；所述蝉拟青霉5704s采自四川省峨眉山的蝉花分离纯化得到，分离鉴定纯化后由中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏号：CGMCCNo.22418，保藏日期：2021年5月10日；（2）按照液料比为50:1往超微粉中加70%甲醇、超声提取后过滤，再次超声提取后过滤，合并提取液；（3）提取液浓缩去醇，冷沉过夜，取上清过滤清亮，上100mlDM130大孔树脂柱，3倍柱体积水洗去杂，5倍柱体积20%乙醇洗脱；收集洗脱液，浓缩成浸膏，加入甲醇50ml，超声溶解，过滤，取滤液过10ml酸性氧化铝柱脱色，并用50ml甲醇洗脱，收集脱色后药液，浓缩蒸干得粗品；（4）取粗品用10ml甲醇超声溶解，过0.45μm微滤膜后通过半制备液相色谱进行分离，有机相为甲醇，水相为水，梯度洗脱，检测波长为260nm，进样量为100μL，收集目的色谱峰，浓缩后真空干燥，得HEA，所述HEA为N6-（2-羟乙基）腺苷。
全文数据：
权利要求：
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