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申请/专利权人:常熟理工学院
摘要:本发明公开了乌饭树叶多糖及其制备方法、应用,乌饭树叶多糖组分相对分子质量为81563Da,其单糖组成为葡萄糖、半乳糖、木糖、鼠李糖,摩尔比为2.13:1.56:1:1.27;乌饭树叶多糖VBLP‑0.5‑2是以新鲜乌饭树叶为原料,经水提、醇沉、脱蛋白、透析、DEAE‑cellulose离子交换柱层析及SephadexG‑100凝胶柱层析、冷冻干燥等步骤分离纯化获得,本发明所述的乌饭树叶多糖VBLP‑0.5‑2具有显著的抗氧化和抗糖基化的作用,可应用于抗氧化剂及UHT奶生产过程中晚期糖基化末端产物抑制剂产品的制备。
主权项:1.乌饭树叶多糖VBLP-0.5-2的制备方法,其特征在于包括如下步骤:(1)粗多糖的提取乌饭树叶清洗干净,粉碎,按照料液比为1:20gmL加入水,在80℃条件下提取40min,提取结束后离心得上清液,50℃减压浓缩,向浓缩液加入四倍体积无水乙醇,4℃静置24h沉淀多糖,10000rmin离心5min,收集得到沉淀,沉淀冷冻干燥后得到乌饭树叶粗多糖;(2)粗多糖的纯化将粗多糖配制成浓度为10mgmL的溶液,加入Sevage试剂脱蛋白3次,然后再通过透析袋透析24h,截留分子量为3500Da,透析液冷冻干燥得到纯化多糖;(3)乌饭树叶多糖组分的分离将乌饭树叶纯化多糖配置成浓度为15mgmL的溶液,然后上样至DEAE-cellulose离子交换柱,依次用浓度为去离子水、0.1、0.3、0.5、0.7molL的NaCl溶液洗脱,流速为1mLmin,自动收集,每管5mL,苯酚-硫酸法检测OD490,绘制洗脱曲线,选择性收集峰面积最大的主峰所对应的洗脱液,即合并0.5molLNaCl溶液所对应的洗脱液,用去离子水对洗脱液透析3次,冷冻干燥得乌饭树叶多糖组分VBLP-0.5;将乌饭树叶多糖组分VBLP-0.5配置成浓度为10mgmL的溶液,上样至SephadexG-100凝胶色谱柱,用浓度为0.2molL的NaCl溶液洗脱,流速为1mLmin,自动收集,每管5mL,苯酚-硫酸法检测OD490,绘制洗脱曲线;根据洗脱曲线,得到两个洗脱峰VBLP-0.5-1和VBLP-0.5-2,选择性收集峰面积最大的主峰VBLP-0.5-2所对应的洗脱液,用去离子水对洗脱液透析24h,冷冻干燥得到所述的乌饭树叶多糖组分VBLP-0.5-2。
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