买专利卖专利找龙图腾，真高效！ 查专利查商标用IPTOP,全免费！专利年费监控用IP管家,真方便！

申请/专利权人：东北大学

摘要：靶向治疗Rspo过度激活导致的结直肠癌的融合蛋白SZ1及其偶联纳米药物，属于生物医药学领域，本发明提供了能够有效抑制全部4种Rspo亚型的高效融合蛋白SZ1，并在细胞、类器官、实验动物等水平全面表征SZ1抑制Rspo所介导的促进结直肠癌发生发展的关键细胞信号通路以及相应肿瘤的生长。同时，结合纳米载药技术和肿瘤细胞靶向技术，制备了不同材料的融合蛋白SZ1的偶联纳米药物，并确认了融合蛋白SZ1的偶联纳米药物可以更有效地抑制全部4种Rspo亚型的活性，更进一步增加了融合蛋白SZ1的稳定性，增强了融合蛋白SZ1的偶联纳米药物对肿瘤的靶向性，能够更有效地在体内抑制并杀伤肿瘤组织起到更好的治疗效果。

主权项：1.一种靶向治疗Rspo过度激活导致的结直肠癌的融合蛋白SZ1，其特征在于，所述的融合蛋白SZ1是由人类FZD5分泌信号肽、V5标签肽、人类LGR4部分胞外域、连接区域、人类ZNRF3部分胞外域以及小鼠IgG2α人IgGH3Fc域所依次排列组成；其中，通过检索NCBIGenBank查找cDNA序列，利用基因合成的方式获得用于扩增人类FZD5分泌信号肽、V5标签肽、人类LGR4部分胞外域、连接区域、人类ZNRF3部分胞外域以及小鼠IgG2α人IgGH3Fc域的cDNA序列所需的PCR引物；用于扩增人类FZD5分泌信号肽及V5标签肽对应的cDNA序列所需的PCR引物为：FWD：CCGGAATTCGCCACCATGGCTCGGCCT；REV：CCGCTCGAGCGTAGAATCGAGACCGAGGA；用于扩增人类LGR4部分胞外域对应的cDNA序列所需的PCR引物为：FWD：GCGTCGACGCGCCACCTCTCTGCGCTG；REV：ACCTGTTGAAGGTGTACAATGGATGATTA；用于扩增连接区域及人类ZNRF3部分胞外域对应的cDNA序列所需的PCR引物为：FWD：TAATCATCCATTGTACACCTTCAACAGGTGGTTCTGGTTCTGGTTCTGGTTCTGGTTCTGGTTCTAAGGAGACGGCGTTCGTGGAGGT；REV：CATGTCAAAGTATTCAGTGGGTTGTCG；用于扩增小鼠IgG2αFc域对应的cDNA序列所需的PCR引物为：FWD：CGACAACCCACTGAATACTTTGACATGGGTTCTGGTTCTGGTTCTGGTTCTGGTTCTGGTTCTCCCAGAGGGCCCACAATCAAG；REV：CCACTAGTCTATTTACCCGGAGTCCGGGAGAAG；用于扩增人IgGH3Fc域对应的cDNA序列所需的PCR引物为：FWD：CGACAACCCACTGAATACTTTGACATGGGTTCTGGTTCTGGTTCTGGTTCTGGTTCTGGTTCTCCCAGAGGGCCCACAATCAAG；REV：CCACTAGTCTATTTACCCGGAGTCCGGGAGAAG；通过PCR技术扩增得到以上cDNA序列，利用overlappingPCR技术将通过PCR技术扩增后的cDNA序列按顺序整合成一段完整的融合蛋白SZ1所对应的cDNA序列；将得到的完整的融合蛋白SZ1所对应的cDNA序列插入自构建的慢病毒表达载体EF1α启动子下游，从而得到包含完整的融合蛋白SZ1所对应的cDNA序列的SZ1质粒；将得到的包含完整的融合蛋白SZ1所对应的cDNA序列的SZ1质粒使用细胞转染试剂，或通过慢病毒载体psPAX2包装、侵染使得所用的哺乳动物细胞系对完整的表达融合蛋白SZ1的质粒进行蛋白表达；在细胞转染或慢病毒侵染后收集被转染或侵染的哺乳动物细胞的培养基；收集的培养基内含有由完整的表达融合蛋白SZ1的质粒所表达的分泌蛋白，即为融合蛋白SZ1。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 东北大学 靶向治疗Rspo过度激活导致的结直肠癌的融合蛋白SZ1及其偶联纳米药物