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申请/专利权人：安徽工程大学

摘要：本发明公开了一种大位阻Fmoc‑AspOtbu‑OH‑树脂复合物及其制备装置和制备方法，该制备装置包括：内管和外套管，内管由上而下依次由出气段、主体段和抽滤段组成，外套管套设于主体段的外部以制得外套管、主体段之间形成有冷却腔；外套管的一端的下方设置有进水口，另一端的上方设置有出水口；出气段的顶部设置有干燥机构，抽滤段的下方设置有浸湿气支管，主体段的内部的底端设置有砂芯。通过该方法和装置能够提高Fmoc‑AspOtbu‑OH、树脂之间的连接率以使得Fmoc‑AspOtbu‑OH‑树脂复合物具有优异的稳定性，同时该方法和装置具有工序简单和操作简便的优点。

主权项：1.一种大位阻Fmoc‑AspOtbu‑OH‑树脂复合物的制备装置，其特征在于，包括：内管1和外套管2，所述内管1由上而下依次由出气段、主体段和抽滤段组成，所述外套管2套设于所述主体段的外部以制得所述所述外套管2、主体段之间形成有冷却腔；所述外套管2的一端的下方设置有进水口6，另一端的上方设置有出水口7；所述出气段的顶部设置有干燥机构3，所述抽滤段的下方设置有浸湿气支管5，所述主体段的内部的底端设置有砂芯4。

全文数据：大位阻Fmoc-AspOtbu-OH-树脂复合物及其制备装置和制备方法技术领域[0001]本发明涉及Fmoc-AspOtbu-0H-树脂复合物，具体地，涉及一种大位阻Fmoc-AspOtbu-OH-树脂复合物及其制备装置和制备方法。背景技术[0002]近年来，研宄发现，由于肿瘤组织的特殊生理病理结构，纳米粒制剂可利用对肿瘤细胞上特异性或过表达受体的识别作用来增强药物载体的主动靶向效果，则可显著提高药物制剂的祀向性，从而改善药物疗效，降低其毒副作用。[0003]整合素㈣阳作为重要的整合素家族成员，在多种肿瘤细胞表面均过表达。人们利用这一特性，设计出多种能够特异性识别avf33家族的短肽。精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸Arg-Gly-Asp，RGD序列和av03结合，发生构象改变而活化，介导细胞信号传递，调节细胞增殖、分化、运动、定居、生存或凋亡等。NGR小肽分子的N天冬酰胺能够通过脱酰胺作用形成异天冬氨酸（isoAsp，使NGR变为isoDGR，能够被整合素av03特异性地识别并结合。is〇DGR-2CCys-isoD-Gly-Arg-Cys，其中两个Cys形成二硫键和cRGDfK均是环形小肽，环形结构的肽较线性结构的多肽更稳定、有更高的亲和性及与受体结合的特异性。这些短肽均含大位阻氨基酸Fmoc-Aspotbu-0H。[0004]多肽合成的方法还是较为成熟的，大抵分为生物法和化学法，生物法又分为发酵法、酶解法、DNA重组技术。发酵法是从培养的微生物产生的代谢产物中提取多肽的方法，其优点是工业化成本低，但是产物范围窄且提纯复杂。而酶水解法虽然获得的蛋白质不会被降解其营养价值，但是很难运用于工业化生产。DNA基因重组有着同样的缺点。[0005]化学法分为固相合成和液相合成，其主要的区别在于是否使用固相载体。固相合成法的原理是将氨基酸的C末端固定在不溶树脂上，然后在此树脂上依次发生缩合和脱水反应，延长肽链。固相合成在每一个氨基酸反应以后，进行洗涤和过滤，从而过量的试剂溶剂对反应不会有太大的影响，这样的反应机制可以防止不需要的副产物，获得更高的产率和更纯的多肽。虽然固相合成法具有上述优异的特性，但是该方法中大位阻氨基酸和树脂的连接率较低。发明内容[0006]本发明的目的是提供一种大位阻Fmoc-AspOtbu-0H-树脂复合物及其制备装置和制备方法，通过该方法和装置能够提高Fmoc-AspOtbu-0H、树脂之间的连接率以使得Fmoc-AspOtbu-0H-树脂复合物具有优异的稳定性，同时该方法和装置具有工序简单和操作简便的优点。[0007]为了实现上述目的，本发明提供了本发明提供了一种大位阻Fmoc-AspOtbu-0H-树脂复合物的制备装置，包括：内管和外套管，内管由上而下依次由出气段、主体段和抽滤段组成，外套管套设于主体段的外部以制得外套管、主体段之间形成有冷却腔;外套管的一端的下方设置有进水口，另一端的上方设置有出水口；出气段的顶部设置有干燥机构，抽滤段的下方设置有浸湿气支管，主体段的内部的底端设置有砂芯。[0008]本发明还提供了一种大位阻Fmoc-AspOtbu-0H-树脂复合物的制备方法，该制备方法在上述的制备装置中进行，包括以下步骤：[0009]1将循环液体通过进水口、出水口流经冷却腔；[0010]2将溶剂置于内管内，并通过浸湿气支管向内管1中鼓入浸湿气直至反应结束；[0011]3在冰浴以及催化剂的存在下，将芴甲氧羰基-天冬氨酸—4—叔丁脂Fm〇c_AspOtbu-0H与N，N-二异丙基乙胺DIEA进行活化反应以得到活化液；[0012]4将活化液、树脂转移至内管中，并加入催化剂、H0BT进行接触反应，反应结束后通过溶剂重复洗涤树脂2_4次；[0013]5将封头试剂加入至内管中进行封端处理，反应结束后通过溶剂重复洗涤树脂2_4次；[00M]6将内管中的产物取出并进行脱保护反应以制得Fmoc-AspOtbu-0H-树脂复合物；[0015]其中，在步骤3和4中，催化剂选自二环己基碳二亚胺DCC、〇-苯并三氮唑-N，N，N’，N’-四甲基脲四氟硼酸酯TBTU、苯并三氮唑-N，N，N’，N’_四甲基脲六氟磷酸盐HBTU、2-7-偶氮苯并三氮唑-N，N，N’，N’_四甲基脲六氟磷酸酯HATU中的至少一者；[0016]在步骤2、4和5中，溶剂选自NMP和THF混合液、!^、01?、0碰、丽?中的至少一者；[0017]树脂选自wang树脂、2-cl树脂和Rink树脂中的至少一者。[0018]本发明进一步提供了一种大位阻Fmoc-AspOtbu-0H-树脂复合物，该大位阻Fmoc-AspOtbu-0H-树脂复合物通过上述的制备方法制备而得。[0019]在上述技术方案，本发明用对称酸酐法和固相合成法相结合的方式制备Fmoc-AspOtbu-树脂复合物，并且利用Fmoc吸光法检测Fmoc-AspOtbu-0H与树脂的连接率。与现有技术相比，本发明提供的对称酸酐法和固相合成法结合的方法具有很多优势：（1固相合成中，在每一个氨基酸反应以后，进行洗涤和过滤，从而过量的试剂溶剂对反应不会有太大的影响，这样的反应机制可以防止不需要的反正，获得更高的产率和更纯的多肽；（2对称酸酐醋酸酐具有酰胺化活性较高，结构高度对称，在合成反应中无选择性，且所得产物无消旋化等诸多优点；（3提高大位阻氨基酸和树脂的结合率，从大规模工业生产的角度看，减少不必要的反应物用量浪费，可大大节约生产成本；⑷反应条件温和，操作简单，可大规模使用，具有普遍性。综上可知，本发明提供的对称酸酐法和固相合成法结合制备Fmoc-AspOtbu-树脂复合物具有:获得更高的产率和更纯的产物、使人工合成多肽的操作更加简易、可大大节约生产成本、具有普遍性，进而使其具有较广阔的应用前景。[0020]此外，对称酸酐法和固相合成法结合制得的Fmoc-AspOtbu-树脂复合物具有优异的稳定性，进一步地使得本发明提供的技术方案能够进行大面积的推广。[°021]本发明的其他特征和优点将在随后的具体实施方式部分予以详细说明。附图说明[0022]附图是用来提供对本发明的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与下面的具体实施方式一起用于解释本发明，但并不构成对本发明的限制。在附图中：[0023]图1是本发明提供的一种大位阻Fmoc-AspOtbu-OH-树脂复合物的制备装置的优选实施方式的结构示意图；[0024]图2是实施例1-3的连接率的统计结果图；[0025]图3是实施例4-8的连接率的统计结果图；[0026]图4是实施例9-14的连接率的统计结果图；[0027]图5是实施例15-18的连接率的统计结果图；[0028]图6是实施例19-21的连接率的统计结果图。[0029]附图标记说明[0030]1、内管2、外套管[0031]3、干燥机构4、砂芯[0032]5、浸湿气支管6、进水口[0033]7、出水口具体实施方式[0034]以下对本发明的具体实施方式进行详细说明。应当理解的是，此处所描述的具体实施方式仅用于说明和解释本发明，并不用于限制本发明。'[0035]在本文中所披露的范围的端点和任何值都不限于该精确的范围或值，这些范围或值应当理解为包含接近这些范围或值的值。对于数值范围来说，各个范围的端点值之间、各个范围的端点值和单独的点值之间，以及单独的点值之间可以彼此组合而得到一个或多个新的数值范围，这些数值范围应被视为在本文中具体公开。[0036]本发明提供了一种大位阻Fmoc-AspOtbu-0H-树脂复合物的制备装置，如图丄所示，包括：内管1和外套管2，内管1由上而下依次由出气段、主体段和抽滤段组成，外套管2套设于主体段的外部以制得外套管2、主体段之间形成有冷却腔;外套管2的一端的下方设置有进水口6,另一端的上方设置有出水口7;出气段的顶部设置有干燥机构3,抽滤段的下方设置有浸湿气支管5，主体段的内部的底端设置有砂芯4。[0037]在上述制备装置中，反应物主要于主体段中进行接触反应，在反应过程中，气体自出气段排出且千燥机构3在排气过程中能够防止外界的水分以及其他杂质进入主体段中，一旦反应结束，便可通过抽滤段使得体系中的物质在自身重力作用或者结合抽滤装置将反应体系中的溶剂或者未反应的反应物以及副产物自抽滤段排出；其中的砂芯4主要能够起到阻隔的作用，使得产物能够在主体段中进行反应;而浸湿气支管5能够向主体段中通入气体进而使得溶剂能够湿润主体段的内壁，以及能够使得反应物能够在反应过程中能够充分接触进而提高反应的效率以及效果。[0038]在本发明中，流经冷却腔的循环液体的具体参数可以在宽的范围内选择，但是为了提高制得的Fmoc-AspOtbu-树脂复合物的产率以及稳定性，优选地，流经冷却腔的循环液体满足以下条件:温度为25_30°C，流速为20-40ms，循环液体的压力为0•01-0•04Mpa;其中，流经冷却腔的循环液的具体种类也可以在宽的范围内选择，如乙醇、二氯甲烷等，但是从经济角度以及安全因素考虑，优选地，流经冷却腔的循环液为水。[0039]在本发明中，砂芯4的具体参数可以在宽的范围内选择，但是为了提高制得的Fmoc-AspOtbu-树脂复合物的产率以及稳定性，优选地，砂芯4为石英砂，粒度为40-140目。[0040]在本发明中，千燥机构3内填充物可以在宽的范围内选择，但是为了提高制得的Fmoc-AspOtbu-树脂复合物的产率以及稳定性，优选地，干燥机构3内填充有无水氯化钙。[0041]在本发明中，主体段的机构可以在宽的范围内选择，但是为了提高制得的Fmoc-AspOtbu-树脂复合物的产率以及稳定性，主体段为上宽下窄的圆台结构。[0042]在本发明中，制备装置的容积以及材质可以在宽的范围内选择，但是为了提高制得的Fmoc-AspOtbu-树脂复合物的产率以及稳定性，制备装置的容积为5mL-lL，材料选自玻璃、塑料、陶瓷中的至少一者。[0043]本发明还提供了一种大位阻Fmoc-AspOtbu-0H-树脂复合物的制备方法，该制备方法在上述的制备装置中进行，包括以下步骤：[0044]1将循环液体通过进水口6、出水口7流经冷却腔；[0045]2将溶剂置于内管1内，并通过浸湿气支管5向内管1中鼓入浸湿气直至反应结束；[0046]3在冰浴以及催化剂的存在下，将芴甲氧羰基-天冬氨酸-4-叔丁脂Fmoc-AspOtbu-0H与N，N-二异丙基乙胺DIEA进行活化反应以得到活化液；[0047]4将活化液、树脂转移至内管1中，并加入催化剂、H0BT进行接触反应，反应结束后通过溶剂重复洗涤树脂2-4次；[0048]5将封头试剂加入至内管1中进行封端处理，反应结束后通过溶剂重复洗涤树脂2-4次；[0049]6将内管1中的产物取出并进行脱保护反应以制得Fmoc-AspOtbu-0H-树脂复合物；[0050]其中，在步骤3和4中，催化剂选自二环己基碳二亚胺DCC、〇-苯并三氮唑-N，N，N’，N’-四甲基脲四氟硼酸酯TBTU、苯并三氮唑-N，N，N’，N’-四甲基脲六氟磷酸盐HBTU、2-7-偶氮苯并三氮唑-叱叱『小’-四甲基脲六氟磷酸酯拟1!1中的至少一者；[0051]在步骤2、4和5中，溶剂选自NMPN-甲基吡咯烷酮）和THF四氢呋喃）混合液、!'册、01^二甲基甲酰胺）、0齡二甲基乙酰胺）、丽？，甲基吡咯烷酮）中的至少一者；[0052]树脂选自wang树脂、2-c1树脂和Rink树脂中的至少一者。[0053]在上述制备方法的步骤2中，溶剂的用量可以在宽的范围内选择，但是为了使得溶剂能够充分地湿润内管1，优选地，在步骤2中，溶剂的用量为l〇-25ml。[0054]在上述制备方法的步骤2中，溶剂浸湿内管1的内壁的时间可以在宽的范围内选择，但是为了使得溶剂能够充分地湿润内管1，优选地，在步骤2中，溶剂浸湿内管1的内壁的时间为5-l〇min。[OO55]在上述制备方法的步骤2中，浸湿气的具体种类可以在宽的范围内选择，但是从经济角度考虑，优选地，浸湿气通过空气泵和氮气栗提供。[0056]在上述制备方法的步骤3中，各物料的用量可以在宽的范围内选择，但是为了提高Fmoc-AspOtbu-树脂复合物的产率以及稳定性，优选地，在步骤3中，相对于〇_〇8-0.49gFmoc-Asp0tbu_0H，所述溶剂的用量为丨5—3〇mL，DIEA的用量为0.5-1.5mL，催化剂的用量为0.3-1.9g。[0057]其中，针对不同种类的催化剂，其具体用量存在差异可以在宽的范围内选择，为了进一步提高Fmoc-AspOtbu-树脂复合物的产率以及稳定性，优选地，在步骤3中，在催化剂为DCX的情形下，獅于G•GS-〇•49gFm〇e—AspQtbu—QH，催化綱臟6—化剂为刪、圆、麵中的至少-者的情形下，相对于〇|〇姆败〇化剂的用量为0.3-0.4g„@_8；1在上述方法齡中，活化反鋪条件在_范_选择，但是为了提尚Fm〇C-AsPOtbU-树脂复合物的产率以及稳定性，优选地，活化应温度为IC〜2卩，反应_为〇.5-21!。[OO59]扯述方法的步骤3中，添料顺序可以在宽的麵内麟，但是为了提高Fmoc-AspOtbu-树脂复合物的产率以及稳定性，优选地，步骤3的添料顺序为.先将Fm〇c_AspOtbu-OH与DIEA混合均匀，然后再添加催化剂。[0060]在上述制备方法的步骤4中，各物料的用量可以在宽的范围内选择，但是为了提高Fmoc-AspOtbu-树脂复合物的产率以及稳定性，优选地，在步骤4中，相对于〇.〇8_〇.49g活化后的Fmoc-AspOtbu-0H，树脂的用量为0_2-0.叱，11册1的用量为4〇_5^，催化剂的用量为0.3-1.9g。’[0061]^中，针对不同种类的催化剂，其具体用量存在差异可以在宽的范围内选择，为了进一步提高Fmoc-AspOtbu-树脂复合物的产率以及稳定性，优选地，在步骤4中，在催化剂为dcc的情形下，相对于o_2-o.8g树脂，催化剂的用量为o.e—ug;在催化剂为TBTU、HBTU、HATU中的至少一者的情形下，相对于0.2-〇.8g树脂，催化剂的用量为〇.3_〇.4g。[0062]在上述制备方法的步骤4中，活化反应的条件可以在宽的范围内选择，但是为了提高Fmoc-AspOtbu-树脂复合物的产率以及稳定性，优选地，接触反应满足以下条件：反应温度为25-30°：，反应时间为1-511。[0063]在上述制备方法的步骤4中，添料顺序可以在宽的范围内选择，但是为了提高Fmoc-AspOtbu-树脂复合物的产率以及稳定性，优选地，步骤4的添料顺序为：先将树脂置于溶剂中浸泡，然后再添加活化后的Fmoc-AspOtbu-0H，最后加入催化剂和H0BT。其中，浸泡的具体条件也可以在宽的范围内选择，但是为了进一步提树脂复合物的产率以及稳定性，优选地，浸泡至少满足以下条件:浸泡温度为25_3〇r，浸泡时间为2-5min〇[0064]在上述制备方法的步骤5中，封头处理的条件可以在宽的范围内选择，但是为了提高Fmoc-AspOtbu-树脂复合物的产率以及稳定性，优选地，在步骤5中，封头处理至少满足以下条件:处理温度为25_3〇°C，处理时间为l-2h。[0065]在本发明中，封头处理的具体操作可以在宽的范围内选择，但是为了进一步提高Ftnoc-AspOtbu-树脂复合物的产率以及稳定性，更优选地，封头处理是通过向反应体系中添加封头试剂而进行，并且封头试剂由醋酸酐、吡啶pyr和二甲基甲酰胺DMF组成。其中，封头试剂的用量也可以在宽的?a围内选择，但是为了进一步提高Fmoc-AspOtbu-树脂复合物的产率以及稳定性，相对于lg的树脂，DMF的用量为15-30mL，醋酸酐的用量为0.5-1.5mL，Pyr的用量为0.5-1.5mL。[0066]在本发明的步骤6中，脱保护反应的具体操作可以在宽的范围内选择，但是为了进一步提高Fmoc-AspOtbu-树脂复合物的产率以及稳定性，优选地，步骤6中，脱保护反应的步骤为:先将产物溶于有机溶剂中，然后向体系中添加脱保护试剂。具体地为:将Fmoc-Aspotbu-树脂复合物转入量筒中，使用DMF定容至20mL，放入磁力搅拌器中，在搅拌均匀的情况下，用移液枪提取40uL，加入脱保护试剂，DMF定容至4mL，混合均匀后，进行脱保护反应。[0067]其中，脱保护试剂的具体种类也可以在宽的范围内选择，但是为了进一步脱保护的效果，优选地，脱保护试剂由哌啶PIP、DMF组成，PIP、DMF的体积比为1:3-5。[0068]同时，脱保护试剂的用量也可以在宽的范围内选择，但是为了进一步脱保护的效果，优选地，在步骤6中，相对于lg的树脂，脱保护试剂的用量为50-lOOuL。[0069]此外，脱保护反应的条件也可以在宽的范围内选择，但是为了进一步脱保护的效果，优选地，脱保护反应至少满足以下条件:温度为25-30°C，时间为15-30min。[0070]在上述脱保护反应中，为了进一步提高脱保护的效果，优选地，脱保护反应磁力搅拌的条件下进行的，磁力搅拌的转速为500-1000rmin。[0071]最后，在上述制备方法中，为了进一步提高Fm〇C-ASp0tbu-树脂复合物的产率以及稳定性，优选地，在步骤3和4中，催化剂为TBTU，在步骤2、4和5中，溶剂为THF，树脂为2_cl树脂。[0072]本发明进一步提供了一种大位阻Fmoc-AspOtbu-0H-树脂复合物，该大位阻Fmoc-AspOtbu-0H-树脂复合物通过上述的制备方法制备而得。[0073]以下将通过实施例对本发明进行详细描述。以下实施例均在如图1所示的装置中进行。[0074]实施例1[0075]a、将砂芯型为石英砂，粒度为40目，容积为20mL的固相合成玻璃反应器套入大小适宜的冷凝管中，并在冷凝管中通入温度为25°C的循环水溶液，流速设置为20ms，循环水压力为〇.〇1-〇.〇4Mpa，将10mLTHF倒入反应器中，打开氮气泵鼓泡，使溶剂浸湿反应器壁，浸湿时间为5min全程用氮气保护，出气口处填入无水CaCl2,用循环水真空栗抽干；[0076]15、在冰浴下，将0.088你〇£；-八3口01:1311-011与0.511^0此4、1511^1'册作溶剂进行活化反应，并加入0.3gTBTU催化反应，在0°C下反应0•5h，随后在THF存在下，将活化液分别转入装有〇.4g的wang树脂的反应器中，同时加入0.3gTBTU、4.0gH0BT，进行接触反应，在25°C下反应lh，用THF重复洗涤树脂3次；[0077]c、将0.5mL醋酸酐、0.5mLPyr和15mLDMF加入反应体系在25°C下反应lh，重复洗涤树脂3次，抽干，将Fmoc-Aspotbu-树脂复合物转入量筒中，DMF定容至20mL，放入磁力搅拌器中，在转速为500rmin的情况下，搅拌均匀，用移液枪提取40此，加入50uL20%PIPDMF20%哌啶溶液），DMF定容至4mL，混合均匀后，在25°C下反应15min，采用Fmoc吸光法，测其在301nm处紫外吸收值，对照为20%PIPDMF溶液，计算连接率。[0078]实施例2[0079]按照实施例1的方法进行，所不同的是，将wang树脂换为2-cl树脂。[0080]实施例3[0081]按照实施例1的方法进行，所不同的是，将wang树脂换为Rink树脂。[0082]实施例4[0083]a、将砂芯型为石英砂，粒度为8〇目，容积为50mL的固相合成玻璃反应器套入大小适宜的冷凝管中，并在冷凝管中通入温度为25°C的循环水溶液，流速设置为30ms，循环水压力为〇.〇l_〇.〇4Mpa，将20mLTHF倒入反应器中，打开氮气栗鼓泡，使溶剂浸湿反应器壁，浸湿时间为8min全程用氮气保护，出气口处填入无水CaCh，用循环水真空泵抽干；[0084]b、在冰浴下，分别称取〇.〇8gFmoc-Asp0tbu-0H与l.OmLDIEA、20mLTHF作溶剂进行活化反应，并加入〇.4gTBTU催化反应，在0°C下反应lh，随后在THF存在下，将活化液分别转入装有〇.2g的2-cl树脂的反应器中，同时加入〇.3gTBTU、4_5gH0BT，进行接触反应，在25°C下反应lh，用THF重复洗涤树脂3次；[0085]c、将l.〇mL醋酸酐、l.OmLPyr和20mLDMF加入反应体系在25°C下反应1.5h，重复洗漆树脂3次，抽干，将Fmoc-Aspotbu-树脂复合物转入量筒中，DMF定容至20mL，放入磁力搅拌器中，在转速为800rmin的情况下，搅拌均匀，用移液枪提取40yL，加入80此20%PIPDMF20%哌啶溶液），DMF定容至4mL，混合均匀后，在25°C下反应2〇min，采用Fmoc吸光法，测其在301nm处紫外吸收值，对照为20%PIPDMF溶液，计算连接率。[0086]实施例5[0087]按照实施例4的方法进行，所不同的是，将Fmoc-AspOtbu-0H的用量换为0.21g。[0088]实施例6[0089]按照实施例4的方法进行，所不同的是，将Fmoc-AspOtbu-0H的用量换为0•33g。[0090]实施例7[0091]按照实施例4的方法进行，所不同的是，将Fmoc-AspOtbu-0H的用量换为0.41g。[0092]实施例8[0093]按照实施例4的方法进行，所不同的是，将Fmoc-AspOtbu-0H的用量换为0.49g。[0094]实施例9[0095]a、将砂芯型为石英砂，粒度为100目，容积为l〇〇mL的固相合成陶瓷反应器套入大小适宜的冷凝管中，并在冷凝管中通入温度为25°C的循环水溶液，流速设置为40ms，循环水压力为0.01-0.04Mpa，将25mLTHF倒入反应器中，打开空气泵鼓泡，使溶剂浸湿反应器壁，浸湿时间为10min全程用空气保护，出气口处填入无水CaCl2,用循环水真空栗抽干；[0096]13、在冰浴下，分别称取0.418?111〇：^8口0让11-011与1.011110比4、251^1'耶作溶剂进行活化反应，并加入0.4gTBTU催化反应，在-2°C下反应lh，随后在THF存在下，将活化液分别转入装有0.5g的2-cl树脂的反应器中，同时加入〇.4gTBTU、4.5gH0BT，进行接触反应，在30°C下分别反应lh，用THF重复洗涤树脂3次；[0097]c、将1.5mL醋酸酐、1.5mLPyr和30mLDMF加入反应体系在30°C下反应2h，重复洗漆树脂3次，抽干，将Fmoc-Aspotbu-树脂复合物转入量筒中，DMF定容至20mL，放入磁力搅拌器中，在转速为1000rmin的情况下，搅拌均匀，用移液枪提取40uL，加入100UL20%PIPDMF20%哌啶溶液），DMF定容至4mL，混合均匀后，在30°C下反应30min，采用Fmoc吸光法，测其在301nm处紫外吸收值，对照为20%PIPDMF溶液，计算连接率。[0098]实施例10t〇〇99]按照实施例9的方法进行，所不同的是，将活化液、树脂、TBTU、H0BT的反应时间换为1.5h。[0100]实施例U[0101]按照实施例9的方法进行，所不同的是，将活化液、树脂、TBTU、H0BT的反应时间换为2h。[0102]实施例12[0103]按照实施例9的方法进行，所不同的是，将活化液、树脂、TBTU、H0BT的反应时间换为2.5h。[0104]实施例13[0105]按照实施例9的方法进行，所不同的是，将活化液、树脂、TBTU、HOBT的反应时间换为3h。[0106]实施例14[0107]按照实施例9的方法进行，所不同的是，将活化液、树脂、TBTU、H0BT的反应时间换为5h。[0108]实施例15[0109]a、将砂芯型为石英砂，粒度为140目，容积为200mL的固相合成陶瓷反应器套入大小适宜的冷凝管中，并在冷凝管中通入温度为30°C的循环水溶液，流速设置为40ms，循环水压力为0.01-〇.〇4Mpa，将25mLTHF倒入反应器中，打开空气泵鼓泡，使溶剂浸湿反应器壁，浸湿时间为lOmin全程用空气保护，出气口处填入无水CaCl2,用循环水真空栗抽干；[0110]b、在冰浴下，分别称取0.41gFmoc-Asp0tbu-0H与1.5mLDIEA、25mLTHF作溶剂进行活化反应，并分别加入1.5mLDCC催化反应，在2°C下反应2h，随后在THF存在下，将活化液分别转入装有〇.5g2-cl树脂的反应器中，同时分别加入1.5mLDCC，再加入4.5gHOBT，进行接触反应，在30°C下分别反应1.5h，用THF重复洗涤树脂3次；[0111]c、将1.5mL醋酸酐、1.5mLPyr和30mLDMF加入反应体系在30°C下反应2h，重复洗漆树脂3次，抽干，将Fmoc-Aspotbu-树脂复合物转入量筒中，DMF定容至20mL，放入磁力搅拌器中，在转速为1000rmin的情况下，搅拌均匀，用移液枪提取40此，加入100此20%PIPDMF20%哌啶溶液），DMF定容至4mL，混合均匀后，在30°C下反应30min，采用Fmoc吸光法，测其在301nm处紫外吸收值，对照为20%PIPDMF溶液，计算连接率。[0112]实施例16[0113]按照实施例15的方法进行，所不同的是，将将步骤b中的前后两次使用的催化剂均换为0.4gTBTU。[0114]实施例17[0115]按照实施例15的方法进行，所不同的是，将将步骤b中的前后两次使用的催化剂均换为0.4gHBTU。[0116]实施例18[0117]按照实施例15的方法进行，所不同的是，将将步骤b中的前后两次使用的催化剂均换为0.4gHATU。[0118]实施例19[0119]a、将砂芯型为石英砂，粒度为140目，容积为200mL的固相合成塑料反应器套入大小适宜的冷凝管中，并在冷凝管中通入温度为30°C的循环水溶液，流速设置为40ms，循环水压力为0•〇1-〇•〇4Mpa，分别将25mLTHF、DMF、DMA、NMP、NMPTHF1:1倒入反应器中，打开空气栗鼓泡，使溶剂浸湿反应器壁，浸湿时间为10min全程用空气保护，出气口处填入无水CaCl2,用循环水真空泵抽干；[0120]b、在冰浴下，称取0.41gFmoc-AspOtbu-0H与1.5mLDIEA分别与溶剂25mLTHF进行活化反应，并分别加入〇.4gTBTU催化反应，在2°C下反应1h，随后分别在THF存在下，将活化液分别转入装有〇.8g2-cl树脂的反应器中，同时分别加入〇.4gTBTU、4.5gHOBT，进行接触反应，在30°C下分别反应1•5h，用THF重复洗洚树脂3次；[0121]c、将1.5mL醋酸酐、1.5mLPyr和20mLDMF加入反应体系在30°C下反应2h，重复洗涤树脂3次，抽干，将Fmoc-Aspotbu-树脂复合物转入量筒中，DMF定容至2〇mL，放入磁力搅拌器中，在转速为1000rmin的情况下，搅拌均匀，用移液枪提取40此，加入80yL2〇%PIPDMF20%哌陡溶液），DMF定容至4mL，混合均勾后，在30°C下反应30min，采用Fmoc吸光法，测其在301nm处紫外吸收值，对照为20%PIPDMF溶液，计算连接率。[0122]实施例18[0123]按照实施例15的方法进行，所不同的是，将步骤b中的溶剂THF换为换为DMF。[0124]实施例19[0125]按照实施例15的方法进行，所不同的是，将步骤b中的溶剂THF换为换为DMA。[0126]实施例20[0127]按照实施例15的方法进行，所不同的是，将步骤b中的溶剂THF换为换为NMP。[0128]实施例21[0129]按照实施例15的方法进行，所不同的是，将步骤b中的溶剂THF换为换为体积比为1:1的NMP和THF的混合液。[0130]结果统计[0131]1实施例1-3的连接率的统计结果见图2;[0132]2实施例4-8的连接率的统计结果见图3;[0133]3实施例9-14的连接率的统计结果见图4;[0134]4实施例15-18的连接率的统计结果见图5;[0135]5实施例19-21的连接率的统计结果见图6。[0136]通过上述检测可知，本发明制得Fmoc-Aspotbu-树脂复合物的最佳工艺路线为：以2-cl树脂作为载体，Fm〇C-Asp〇tbu-0H与树脂的投料量摩尔比为〇.5:1，反应时间为1.5h，最佳催化剂为roTU，最佳溶剂为THF;同时通过紫外分光光度计的检测表明，Fmoc-Aspotbu-0H与树脂的连接率最大可达到99•88%。[0137]以上详细描述了本发明的优选实施方式，但是，本发明并不限于上述实施方式中的具体细节，在本发明的技术构思范围内，可以对本发明的技术方案进行多种简单变型，这些简单变型均属于本发明的保护范围。[0138]另外需要说明的是，在上述具体实施方式中所描述的各个具体技术特征，在不矛盾的情况下，可以通过任何合适的方式进行组合，为了避免不必要的重复，本发明对各种可能的组合方式不再另行说明。[0139]此外，本发明的各种不同的实施方式之间也可以进行任意组合，只要其不违背本发明的思想，其同样应当视为本发明所公开的内容。

权利要求：1.一种大位阻Fmoc-AspOtbu-OH-树脂复合物的制备装置，其特征在于，包括：内管1和外套管2，所述内管（1由上而下依次由出气段、主体段和抽滤段组成，所述外套管2套设于所述主体段的外部以制得所述所述外套管（2、主体段之间形成有冷却腔;所述外套管⑵的一端的下方设置有进水口（6，另一端的上方设置有出水口（7;所述出气段的顶部设置有干燥机构（3，所述抽滤段的下方设置有浸湿气支管¾，所述主体段的内部的底端设置有砂芯⑷。2.根据权利要求1所述的制备装置，其中，流经所述冷却腔的循环液体满足以下条件：温度为25_3〇°C，流速为20-40ms，循环液体的压力为〇•〇1-〇•〇4Mpa;优选地，流经所述冷却腔的循环液为水；更优选地，所述砂芯⑷为石英砂，粒度为40-140目；进一步优选地，所述干燥机构⑶内填充有无水氯化钙；更进一步优选地，所述主体段为上宽下窄的圆台结构;所述制备装置的容积为5mL-lL，材料选自玻璃、塑料、陶瓷中的至少一者。3.—种大位阻Fmoc-AspOtbu-0H-树脂复合物的制备方法，其特征在于，所述制备方法在权利要求1或2所述的制备装置中进行，包括以下步骤：1将所述循环液体通过进水口（6、出水口（7流经所述冷却腔；2将溶剂置于所述内管（1内，并通过所述浸湿气支管5向所述内管（1中鼓入浸湿气直至反应结束；3在冰浴以及催化剂、溶剂的存在下，将芴甲氧羰基-天冬氨酸-4-叔丁脂Fmoc-AspOtbu-0H与N，N-二异丙基乙胺DIEA进行活化反应以得到活化液；4将所述活化液、树脂转移至所述内管（1中，并加入催化剂、H0BT进行接触反应，反应结束后通过溶剂重复洗涤树脂2-4次；5将封头试剂加入至所述内管（1中进行封端处理，反应结束后通过溶剂重复洗涤树脂2-4次；6将所述内管（1中的产物取出并进行脱保护反应以制得Fmoc-AspOtbu-0H-树脂复合物；其中，在步骤3和4中，所述催化剂选自二环己基碳二亚胺DCC、〇-苯并三氮唑-N，N，N’，N’-四甲基脲四氟硼酸酯TBTU、苯并三氮唑-N，N，N’，N’-四甲基脲六氟磷酸盐HBTU、2_7_偶氮苯并三氮唑_N，N，N’，N’_四甲基脲六氟磷酸酯HATU中的至少一者；在步骤2、3、4和5中，所述溶剂选自NMP和THF混合液、00；1、1'册、01^、0獻、匪?中的至少一者；所述树脂选自wang树脂、2_c1树脂和Rink树脂中的至少一者。4.根据权利要求3所述的制备方法，其中，在步骤2中，所述溶剂的用量为l〇-25ml;优选地，在步骤2中，所述溶剂浸湿所述所述内管⑴的内壁的时间为5-l〇min;更优选地，所述浸湿气通过空气栗和氮气栗提供。5.根据权利要求3所述的制备方法，其中，在步骤3中，相对于〇.08-0.49g所述Fmoc-AspOtbu-OH，所述溶剂的用量为15-30mL，DMA二甲基乙酰胺）、NMPN_甲基吡咯烷酮）中的至少一者，所述DIEA的用量为0•5-1•5mL，所述催化剂的用量为〇.3-1.9g;优选地，在步骤3中，在所述催化剂为DCC的情形下，相对于〇.08-0.49g所述Fmoc-AspOtbu-0H，所述催化剂的用量为0•6-1•8g;在所述催化剂为TBTU、HBTU、HATU中的至少一者的情形下，相对于〇•〇8_〇•所述Fmoc-AspOtbu-0H，所述催化剂的用量为〇.3-0.4g;更优选地，所述活化反应满足以下条件:反应温度为-2°C〜2°C，反应时间为0.5-2h;进一步优选地，步骤3的添料顺序为：先将Fmoc-AspOtbu-OH与DIEA混合均匀，然后再添加所述催化剂。6.根据权利要求3所述的制备方法，其中，在步骤4中，相对于0.08-0.49g活化后的所述Fmoc-AspOtbu-0H，所述树脂的用量为0.2-0.8g，所述H0BT的用量为4.0-5.0g，所述催化剂的用量为0.3-1.9g;优选地，在步骤4中，在所述催化剂为DCC的情形下，相对于0.2-0.8g所述树脂，所述催化剂的用量为〇•6-1•8g;在所述催化剂为TBTU、HBTU、HATU中的至少一者的情形下，相对于0.2-0.8g所述树脂，所述催化剂的用量为0.3-0.4g;更优选地，所述接触反应满足以下条件:反应温度为25-30°C，反应时间为l-5h;进一步优选地，步骤4的添料顺序为:先将树脂置于溶剂中浸泡，然后再添加活化后的Fmoc-AspOtbu-0H，最后加入催化剂和H0BT;更进一步优选地，所述浸泡至少满足以下条件：浸泡温度为25-30°C，浸泡时间为2-5min〇7.根据权利要求3所述的制备方法，其中，在步骤5中，所述封头处理至少满足以下条件:处理温度为25-30°C，处理时间为1-2h;更优选地，所述封头处理是通过向反应体系中添加封头试剂而进行，并且所述封头试剂由醋酸酐、吡啶Pyr和二甲基甲酰胺DMF组成；进一步优选地，相对于lg的所述树脂，所述DMF的用量为15-30mL，所述醋酸酐的用量为0.5-1•5mL，所述Pyr的用量为0.5-1.5mL。8.根据权利要求3所述的制备方法，其中，在步骤6中，所述脱保护反应的步骤为:先将所述产物溶于有机溶剂中，然后向体系中添加脱保护试剂；优选地，所述脱保护试剂由哌啶PIP、DMF组成，所述PIP、DMF的体积比为1:3-5;更优选地，在步骤6中，相对于lg的所述树脂，所述脱保护试剂的用量为50-100此；进一步优选地，所述脱保护反应至少满足以下条件:温度为25-30°C，时间为15_30min;更进一步优选地，所述脱保护反应磁力搅拌的条件下进行的，磁力搅拌的转速为500-lOOOrmin。9.根据权利要求3-8中任意一项所述的制备方法，其中，在步骤3和4中，所述催化剂为TBTU，在步骤2、4和5中，所述溶剂为THF，所述树脂为2-cl树脂。10.—种大位阻Fmoc-AspOtbu-0H-树脂复合物，其特征在于，所述大位阻Fmoc-AspOtbu-OH-树脂复合物通过权利要求3-9中任意一项所述的制备方法制备而得。

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