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恭喜中国人民解放军总医院第一医学中心马秀清获国家专利权

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龙图腾网恭喜中国人民解放军总医院第一医学中心申请的专利海水淹溺致急性肺损伤模型的构建方法及应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN120005809B

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-06-27发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202510479491.0,技术领域涉及:C12N5/071;该发明授权海水淹溺致急性肺损伤模型的构建方法及应用是由马秀清;梁志欣;张兆瑞;莫振飞;李春笋设计研发完成,并于2025-04-17向国家知识产权局提交的专利申请。

海水淹溺致急性肺损伤模型的构建方法及应用在说明书摘要公布了:本发明提供了海水淹溺致急性肺损伤模型的构建方法及应用,构建模型时将肺微血管内皮细胞和II型肺泡上皮细胞均接种到transwell插件上,将transwell插件并置于肺芯片中,将肺芯片置于摇床动态培养5天,使其形成完整的气液界面,完成肺芯片的构建;将肺芯片的下通道更换为1mL新鲜混合培养基,在上通道的两孔中分别缓慢加入500µL人工海水,置于37℃5%二氧化碳培养箱中摇床上动态培养2小时。本发明将肺芯片技术应用于海水淹溺致急性肺损伤模型中,且同时采用肺微血管内皮细胞和II型肺泡上皮细胞,将海水直接加入制备好的肺芯片上然后慢慢渗透到下层的通道中,模型更加接近海水淹溺的真实发生过程,在海水淹溺致急性肺损伤的相关研究中更具有临床价值的有益效果。

本发明授权海水淹溺致急性肺损伤模型的构建方法及应用在权利要求书中公布了:1.一种构建海水淹溺致急性肺损伤模型的方法,其特征在于,包括以下步骤: S1.对肺芯片进行紫外灭菌处理; S2.用I型胶原colI修饰transwell插件:将I型胶原coll以1:100比例稀释于0.02M冰醋酸中得到修饰液,所述Transwell插件内加入100uL修饰液,孔内加入500uL修饰液,过夜; S3.肺微血管内皮细胞接种:将50ul1×106ml细胞悬液置于24孔板孔的底部中央,将所述transwell插件置于所述24孔板孔的孔内,将装有所述transwell插件的24孔孔板倒立,置于37℃5%二氧化碳培养箱中2h,正置; S4.II型肺泡上皮细胞接种:将100ul1×105ml细胞悬液接种于所述transwell插件上表面,置于37℃5%二氧化碳培养箱中过夜,吸干所述transwell插件内液体; S5.取出所述transwell插件并置于所述肺芯片中间两个孔内,在所述肺芯片两侧加液孔内加入2ml混合培养基,并去除所述transwell插件下的气泡; S6.将所述肺芯片置于摇床动态培养5天,每1-2天更换混合培养基,使其形成完整的肺气液界面,完成肺芯片的构建,其中,所述摇床的转速为5rpm以及摇摆振荡角度为10°; S7.将所述肺芯片的下通道更换为1mL新鲜的混合培养基,在上通道中间的两细胞孔中分别缓慢加入500μL人工海水,置于37℃5%二氧化碳培养箱中摇床上动态培养2小时,其中,所述摇床的转速为5rpm,摇摆振荡角度为10°,以及所述人工海水的成分包括:NaCl26.518gL,MgSO43.305gL,MgCl22.447gL,KCl0.725gL,CaCl21.141gL,NaHCO30.202gL,NaBr0.083gL, 其中,步骤S5、S6和S7中的所述混合培养基由RPMI1640与HULEC-5a培养基按体积比1:1配制。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术,可联系本专利的申请人或专利权人中国人民解放军总医院第一医学中心,其通讯地址为:100853 北京市海淀区复兴路28号;或者联系龙图腾网官方客服,联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

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