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龙图腾网恭喜北京百力格生物科技有限公司申请的专利通过熔解曲线检测待测靶核酸的方法及其试剂盒获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN119685458B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-06-20发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202510205654.6，技术领域涉及：C12Q1/686；该发明授权通过熔解曲线检测待测靶核酸的方法及其试剂盒是由佟宗轩;李俊;莫瑞瑞设计研发完成，并于2025-02-25向国家知识产权局提交的专利申请。

本通过熔解曲线检测待测靶核酸的方法及其试剂盒在说明书摘要公布了：本发明提供一种通过熔解曲线检测待测靶核酸的方法及其试剂盒，所述方法包括针对待测靶核酸序列设计第一引物、第二引物和检测探针，在含有所述第一引物、第二引物和检测探针、待测样品、限制性核酸内切酶和DNA聚合酶的PCR扩增体系中进行PCR扩增，生成的报告引物与检测探针互补配对，形成双链产物，获得该双链产物的熔解曲线，该双链产物的熔解曲线是所述待测靶核酸对应的熔解曲线。本发明所述方法是一种非靶标依赖的熔解曲线方法，可以预先计算每一种双链体各自的熔点（Tm值），解决了待测靶核酸序列易突变带来的熔解曲线峰偏移，易误判的问题。

本发明授权通过熔解曲线检测待测靶核酸的方法及其试剂盒在权利要求书中公布了：1.一种通过熔解曲线检测待测靶核酸的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：步骤1：针对所述待测靶核酸序列设计第一引物、第二引物和检测探针，其中：a.所述第一引物从5’端至3’端依次为标签序列，限制性核酸内切酶特异性识别序列和靶核酸识别序列；所述标签序列不能与所述待测靶核酸结合，所述限制性核酸内切酶特异性识别序列是指被限制性核酸内切酶识别的双链寡核苷酸链序列中的任意一条单链寡核苷酸链序列，所述靶核酸识别序列是指与所述待测靶核酸特异性结合的序列；b.第二引物，所述第二引物与所述待测靶核酸特异性结合，所述第二引物和所述第一引物用于扩增所述待测靶核酸；c.检测探针，所述检测探针的序列包含所述第一引物中标签序列和限制性核酸内切酶特异性识别序列组成的连续序列；检测探针上修饰有报告基团，以便于在检测阶段形成熔解曲线峰，所述检测探针上修饰的报告基团是一组配对的淬灭基团和荧光基团；步骤2：在含有所述第一引物、第二引物和检测探针、待测样品、限制性核酸内切酶和DNA聚合酶的PCR扩增体系中进行PCR扩增，若待测样品中含有所述待测靶核酸，所述第一引物中的靶核酸识别序列与所述待测靶核酸特异性结合，并在其上延伸生成一条新的单链，该新的单链5’端是所述第一引物的标签序列和限制性核酸内切酶特异性识别序列，所述第二引物与上述延伸生成的新的单链特异性结合，并在其上延伸生成5’端是所述标签序列和所述限制性核酸内切酶特异性识别序列的双链扩增产物；所述限制性核酸内切酶将特异性识别所述双链扩增产物中的限制性核酸内切酶特异性识别序列，并进行酶切，分别在双链寡核苷酸链中各产生一个酶切切口；在下一轮PCR变性阶段，被切割的所述双链寡核苷酸链片段游离，游离片段中可以与检测探针互补的片段成为报告引物；报告引物可以沿着检测探针延伸，形成新的双链寡核苷酸链；步骤3：步骤2中生成的报告引物与所述检测探针互补配对延伸，形成双链产物，获得该双链产物的熔解曲线，该双链产物的熔解曲线是所述待测靶核酸对应的熔解曲线，从而实现所述待测靶核酸的检测。

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