恭喜北京小仙炖生物科技有限公司;小仙炖霸州食品有限公司王东亮获国家专利权
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龙图腾网恭喜北京小仙炖生物科技有限公司;小仙炖霸州食品有限公司申请的专利一种基于特征性肽段的燕窝真伪鉴定方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN115825255B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-06-03发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202211023579.4,技术领域涉及:G01N30/02;该发明授权一种基于特征性肽段的燕窝真伪鉴定方法是由王东亮;戴建业;郭伟恒;林小仙;苗树;邱爽设计研发完成,并于2022-08-25向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种基于特征性肽段的燕窝真伪鉴定方法在说明书摘要公布了:本发明涉及一种基于特征性肽段的燕窝真伪鉴定方法。在进行燕窝真伪鉴定时,本发明通过蛋白提取、提取蛋白质酶切、燕窝肽段UPLC‑QTOF‑MS检测以及特征性肽段检测等步骤,通过鉴定是否检出关于燕窝的5条特征性肽段序列来鉴定待检品中的燕窝成分。本发明基于5个特征性肽段对燕窝真伪进行检验,可靠性高。
本发明授权一种基于特征性肽段的燕窝真伪鉴定方法在权利要求书中公布了:1.一种基于特征性肽段的燕窝真伪鉴定的方法,其特征在于,包括以下步骤:1蛋白样品的制备:在待检品蛋白中加入尿素混匀后进行冰浴超声,混匀后提取上清液,然后在所述上清液中加入5倍体积的冷乙腈并进行沉淀;随后对沉淀进行离心并弃上清,将所述沉淀用冷乙腈洗涤后用尿素或碳酸氢铵超声重悬,制备蛋白样品;2蛋白烷基化和酶切:用BCA试剂盒进行蛋白浓度测定,将提取出的蛋白溶于碳酸氢铵中,并进行还原和烷基化;以1:80的比例加入质谱级胰蛋白酶消化4h,补加胰酶至1:50消化24h;然后进行离心后取上清液,将所述上清液过滤膜并取续滤液;3燕窝肽段UPLC-QTOF-MS检测:肽段经ACQUITYUPLCBEHC18色谱柱分离;流动相A为含0.1%甲酸的水溶液,流动相B为含0.1%甲酸的乙腈;流动相梯度为0-1.5min:5%B;1.5~3min:5%~15%B;3~13min:15%~40%B;13~13.5min:40%~95%B;13.5~16min:95%B;4燕窝特征性肽段标准曲线建立:以燕窝原料样本中的各肽段浓度作为标准浓度进行标准曲线的绘制;将各标准曲线溶液从低到高分别进行LC-MS分析,以对照品峰面积为纵坐标,对照品浓度为横坐标制备标准曲线;5特征性肽段检测:从所述标准曲线读出供试品溶液中相当于多肽EM,LL,YP,LA,LE的量;检验是否检出以下5条特征性肽段序列,若均未被检出,则鉴定待检品不含燕窝成分; ;质谱数据通过安捷伦6560Q-TOF质谱采集,正离子模式下质谱参数为:气体温度225℃,干气体10Lmin,喷雾器25psi,鞘气温度400℃,鞘气流量12Lmin,Vcap3500V,喷嘴电压500V,碎裂电压400V,扫描范围为20-1700mz。
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