恭喜上海交通大学医学院附属仁济医院刘庄获国家专利权
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龙图腾网恭喜上海交通大学医学院附属仁济医院申请的专利一种DNA纳米花及其制备方法和用途获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN115094056B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-05-30发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202210718372.2,技术领域涉及:C12N15/10;该发明授权一种DNA纳米花及其制备方法和用途是由刘庄;杨宇;刘学良设计研发完成,并于2022-06-23向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种DNA纳米花及其制备方法和用途在说明书摘要公布了:本发明公开了是一种DNA纳米花及其制备方法和用途。本发明着眼于协同促进骨形成和抗骨吸收的治疗策略,通过优化的滚环扩增技术构建了富含Ca2+和多价CpG的新型DNA纳米花DNFs用于治疗骨质疏松。相较于现有的骨质疏松治疗药物,DNFs利用破骨细胞与骨表面的酸性微环境酸响应释放Ca2+,通过增强骨质胶原矿化修复受损的骨组织,增强骨骼硬度。另一方面,DNFs可利用多价CpG通过细胞免疫调节抑制破骨细胞活力,减少破骨细胞对骨骼的吸收作用。本发明制备的DNFs可有效协同免疫调节和增强骨修复联合治疗骨质疏松,有望拓展DNA纳米材料应用的广泛性,也为纳米技术治疗骨质疏松提供新的理论依据和技术保障。
本发明授权一种DNA纳米花及其制备方法和用途在权利要求书中公布了:1.一种DNA纳米花,其特征在于:所述DNA纳米花含有Ca离子和多价CpG,所述DNA纳米花的制备方法包括以下步骤:第一步、将100μM磷酸化模板和200μM初级引物以1:2的比例在PBS或水溶液中混合得到混合物,所述磷酸化模板的序列为:GACTGGTATATTTTTTAACGTCAGGAACGTCATGGATTTTTAACGCTATAGT,所述初级引物的序列为:ATATACCAGTCACTATAGCGTT;第二步、将第一步所得的混合物依次经过多次循环加热,然后使用PCR热反应器逐渐冷却至20℃;第三步、用第二步所得冷却至20℃的产物制备环状DNA,退火后,加入T4DNA连接酶和T4DNA连接酶缓冲液,并孵育反应溶液在16℃中过夜;将反应溶液加热至65℃维持10分钟,形成闭合的DNA环;第四步、然后将第三步所得闭合的DNA环与Phi29DNA聚合酶、dNTPs混合在反应缓冲溶液中,在37℃反应2h;第五步、将第四步所得产物和Ca2+混合,然后在室温孵育24小时,终止反应得到含有Ca2+和多价CpG的DNA纳米花。
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