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龙图腾网恭喜中国科学院青岛生物能源与过程研究所申请的专利一种催化小分子含氮杂环化合物氮乙酰化的方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN116240197B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-05-30发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202310104855.8，技术领域涉及：C12N9/18；该发明授权一种催化小分子含氮杂环化合物氮乙酰化的方法是由咸漠;姜龙;徐超设计研发完成，并于2023-02-13向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种催化小分子含氮杂环化合物氮乙酰化的方法在说明书摘要公布了：一种催化小分子含氮杂环化合物氮乙酰化的方法，属于酶工程研究开发技术领域。针对现有技术中暂无催化含氮杂环氮乙酰化反应的问题，本发明提供了利用一类角质酶高效催化氮杂环乙酰化反应的方法，具体将角质酶基因修饰的质粒导入大肠杆菌BL‑21，获得重组大肠杆菌，然后对重组大肠杆菌进行培养，诱导，经细胞破碎等步骤获得粗酶液，然后经蛋白纯化，浓缩获得纯化角质酶，加入到含有氨基供体和酰基供体的有机试剂中进行反应。本发明所述方法以便宜的羧酸类化合物为原料，首次以角质酶为催化剂制备乙酰基修饰的氮杂环衍生物，可有效结合亲水性的氮杂环、乙酸，有利于分子结构较大的氮杂环底物与活性中心的识别，是一种绿色安全的制备方法。

本发明授权一种催化小分子含氮杂环化合物氮乙酰化的方法在权利要求书中公布了：1.一种催化小分子含氮杂环化合物氮乙酰化的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：S1、将角质酶基因修饰的质粒导入大肠杆菌BL-21，获得重组大肠杆菌，对重组大肠杆菌进行培养，当菌液OD600于0.6至0.8之间时，进行诱导，诱导后将发酵液离心，弃去上清液，菌体使用PBS缓冲液重悬，并重复离心步骤两次，得到大肠杆菌BL21悬浮液；所述角质酶为氨基酸序列如SEQIDNO.1所示的cutinase1；S2、使用高压细胞破碎仪将菌体破碎，离心，舍弃沉淀，得到粗酶液；配置纯化蛋白所需溶剂，使用镍柱进行蛋白纯化，得到目的蛋白，使用超滤管进行浓缩，得到纯化酶；S3、将氨基供体、酰基供体溶于有机溶剂中，加入纯化酶反应，进行气相定量检测；所述氨基供体为哌嗪，哌啶或四氢吡咯；当氨基供体为哌啶时，将哌啶和乙酸溶于N,N-二甲基甲酰胺中，当氨基供体为哌嗪时，将哌嗪和乙酸溶于N,N-二甲基甲酰胺中，当氨基供体为四氢吡咯时，将四氢吡咯和乙酸溶于乙腈中；所述氨基供体与酰基供体的物质的量之比为1.5:2～1:3，所述纯化酶的终浓度为0.9～1.5mgmL；所述反应温度为40℃，反应时间为12h。

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