恭喜上海市第六人民医院文根获国家专利权
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龙图腾网恭喜上海市第六人民医院申请的专利一种去细胞真皮水凝胶及其制备方法与应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116637229B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-05-23发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202310367659.X,技术领域涉及:C12N5/0786;该发明授权一种去细胞真皮水凝胶及其制备方法与应用是由文根;余雅玲;肖慧敏;刘衒哲;陈欣;柴益民设计研发完成,并于2023-04-07向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种去细胞真皮水凝胶及其制备方法与应用在说明书摘要公布了:本发明涉及生物技术领域,提供一种去细胞真皮水凝胶及其制备方法与应用;本发明的去细胞真皮水凝胶通过调节细胞增殖、迁移和免疫应答对组织再生发挥多重作用,从而促进创面的全层修复,对组织过程和再生医学的发展具有重要的作用;本发明的去细胞真皮水凝胶通过仿时序性细胞因子释放调控体内免疫微环境,促进血管内皮细胞和成纤维细胞的生长增殖,促进皮肤附属器官再生,显著促进创面愈合,与商品敷料相比,本发明的去细胞真皮水凝胶极大地缩短了创面愈合时间,加速了皮肤结构和功能的重建。
本发明授权一种去细胞真皮水凝胶及其制备方法与应用在权利要求书中公布了:1.一种去细胞真皮水凝胶的制备方法,其特征在于,步骤包括:S1、制备M1表型极化的巨噬细胞条件培养基以及M2表型极化的巨噬细胞条件培养基;S2、取动物来源的真皮层,将真皮层依次进行去细胞处理、第一冻干处理以及粉碎处理,制得真皮去细胞支架;S3、将真皮去细胞支架溶解于含有盐酸以及胃蛋白酶的PBS溶液中,制得真皮去细胞支架溶液,并依次进行消化处理、酰化处理、透析处理以及第二冻干处理,制得光敏性去细胞真皮冻干粉;S4、将M1表型极化的巨噬细胞条件培养基、光敏性去细胞真皮冻干粉以及光引发剂混合,制得M1型免疫因子的去细胞预凝胶;S5、将M2表型极化的巨噬细胞条件培养基、光敏性去细胞真皮冻干粉以及光引发剂混合,制得M2型免疫因子的去细胞预凝胶;S6、将M2型免疫因子的去细胞预凝胶放入模具内,紫外光照进行光固化处理得到M2型免疫因子的去细胞水凝胶,将M1型免疫因子的去细胞预凝胶包覆于M2型免疫因子的去细胞水凝胶之外,并于紫外照射下进行固化处理,即得去细胞真皮水凝胶;步骤S1包括:S11、分离小鼠的胫骨以及股骨,消毒后,采用DMEM完全培养基将胫骨以及股骨中的骨髓冲洗至离心管中;S12、在离心管中加入红细胞裂解液,反复吹打后静置,静置后进行离心处理并去除上清液;S13、在离心管内加入DMEM细胞培养液悬浮细胞并进行过滤处理后进行离心,去除上清液并重复本步骤一次;S14、在离心管内加入刺激培养基,诱导骨髓细胞分化为巨噬细胞;调整细胞密度至1×106个mL并置于37℃、5%CO2培养箱中培养,待后续处理;刺激培养基为含有10ngmL巨噬细胞集落刺激因子的DMEM完全培养基;S15、更换刺激培养基继续培养4天后,再次更换刺激培养基;在刺激培养基中加入含有50ngmLIFNγ的100ngmL脂多糖,进行M1极化处理;在刺激培养基中加入10ngmLIL-4和或10ngmLIL-13,进行M2极化处理;S16、分别收集M1极化处理以及M2极化处理后的培养基,离心取上清,即得M1表型极化的巨噬细胞条件培养基以及M2表型极化的巨噬细胞条件培养基。
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