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龙图腾网恭喜华东理工大学申请的专利一种生物发酵法制备稳定同位素标记ssDNA的方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN117143897B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-05-16发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202311152733.2，技术领域涉及：C12N15/70；该发明授权一种生物发酵法制备稳定同位素标记ssDNA的方法是由王申林;邹梦冰;马常兴设计研发完成，并于2023-09-07向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种生物发酵法制备稳定同位素标记ssDNA的方法在说明书摘要公布了：本发明提供了一种生物发酵法制备稳定同位素标记的单链DNAssDNA的方法，属于DNA合成技术领域。本发明的方法将ssDNA的目标序列重复串联在高拷贝载体上，并通过在目标序列5’和3’末端分别添加第一限制性内切酶的位点和第二限制性内切酶的位点，对重组载体进行酶切后，得到不对称的双链DNA结构，进而通过变性分离获得长度不等的两条ssDNA，其中包括15N或13C标记的靶ssDNA，本发明的方法能够有效提高ssDNA的产量，从而提高ssDNA的体外合成效率。并且，本发明培养宿主菌采用的培养基以价格相对廉价的15N标记的NH4Cl为唯一氮源和或13C标记的葡萄糖为唯一碳源，能够有效降低合成成本。

本发明授权一种生物发酵法制备稳定同位素标记ssDNA的方法在权利要求书中公布了：1.一种生物发酵法制备稳定同位素标记ssDNA的方法，其特征在于，包括以下步骤：1）在目标序列5’和3’末端分别添加第一限制性内切酶的位点和第二限制性内切酶的位点，得到重复单元；所述第一限制性内切酶和第二限制性内切酶为两个不同的限制性内切酶；2）将步骤1）所述重复单元串联，得到融合序列；3）将步骤2）所述融合序列插入到高拷贝载体，得到重组载体；4）将步骤3）所述重组载体导入宿主菌，得到重组菌；5）对步骤4）所述重组菌进行培养后，提取和纯化所述重组菌中的重组载体；所述培养采用的培养基以15NH4Cl为唯一氮源和或以13C-葡萄糖为唯一的碳源；6）采用第一限制性内切酶和第二限制性内切酶对步骤5）所述重组载体进行酶切，得到不对称的双链DNA结构，分离获得长度不等的两条ssDNA，所述两条ssDNA中一条为目标序列；7）回收步骤6）所述两条ssDNA中的目标序列，得到稳定同位素标记的靶ssDNA；所述目标序列包括端粒ssDNA、人类启动子ssDNA或HIVssDNA；所述端粒ssDNA的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示；所述人类启动子ssDNA的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示；所述HIVssDNA的核苷酸序列如SEQIDNO.3所示；当所述目标序列为端粒ssDNA时，步骤2）中12个重复单元串联；当所述目标序列为人类启动子ssDNA时，步骤2）中20个重复单元串联；当所述目标序列为HIVssDNA时，步骤2）中15个重复单元串联。

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