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龙图腾网恭喜南京中医药大学申请的专利一种瓶内、瓶外结合的茅苍术组培育苗的方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN117136845B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-05-02发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202311221710.2，技术领域涉及：A01H4/00；该发明授权一种瓶内、瓶外结合的茅苍术组培育苗的方法是由谷巍;刘梦雪;杨增财;田荣;李思蒙设计研发完成，并于2023-09-21向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种瓶内、瓶外结合的茅苍术组培育苗的方法在说明书摘要公布了：本发明公开了一种瓶内、瓶外结合的茅苍术组培育苗的方法，它包括茅苍术外植体不定芽诱导、茅苍术继代增殖培养、茅苍术继代组培苗瓶外生根和组培苗移栽等步骤。本发明通过大量实验进一步优化茅苍术不定芽诱导、增殖、不定芽诱导培养基、继代增殖培养基和扦插生根的基质，并首次结合瓶内和瓶外生根技术对茅苍术继代芽苗进行生根诱导，可节约生产成本，缩短育苗周期，提高移栽成活率，为获得茅苍术组培苗提供了一种新的方法，对服务于茅苍术育苗的实际生产，进一步加快茅苍术工厂化育苗进程，具有重要的应用价值。

本发明授权一种瓶内、瓶外结合的茅苍术组培育苗的方法在权利要求书中公布了：1.一种瓶内、瓶外结合的茅苍术组培育苗的方法，其特征在于，包括以下步骤；（1）外植体选择与灭菌采集江苏句容茅山的茅苍术种子，净制除杂后放于清水中浸泡，浸泡后的种子用75%的乙醇消毒，用氯化汞消毒，无菌水冲洗；然后将种子接种于MS培养基内，以12~15d苗龄的无菌苗为外植体进行不定芽诱导；（2）茅苍术外植体不定芽诱导选择茅苍术种子苗12~15d苗龄的健壮无菌苗，切取下胚轴，下胚轴的切割方式以横切，剪去根、叶片和子叶，仅保留下胚轴为准，将切取的下胚轴接种于不定芽诱导培养基中进行茅苍术外植体不定芽诱导；（3）茅苍术继代增殖培养待茅苍术不定芽诱导生长至2.0~2.5cm，竖直接种到继代增殖培养基中进行继代增殖培养，获得茅苍术继代丛生芽苗；（4）茅苍术继代组培苗瓶外生根（4.1）炼苗选择步骤（3）苗高≥3cm,5cm，叶片数5~7的继代丛生芽苗，移至人工气候室炼苗，将瓶盖旋至半开继续炼苗，再将瓶盖全开炼苗后扦插；（4.2）继代芽苗切割用镊子轻轻取出继代丛生芽苗，清水将残留基质清洗干净，用剪刀将单个芽苗分离，切除褐化愈伤组织后进行消毒处理；（4.3）继代芽苗消毒将步骤（4.2）单芽苗茎基部的愈伤组织部分切除后，将单芽苗放入高锰酸钾中浸泡，取出后漂洗干净进行生根处理；（4.4）继代芽苗扦插生根将芽苗茎基部1-2cm用NAA处理，然后在穴盘的基质中间戳一个小坑，将继代芽苗栽入，栽种深度，摁土紧实，浇定根水，并保持叶面湿润；（5）组培苗移栽待组培苗根系长至包裹基质，瓶外生根完成，继而移栽至常规基质育苗盆中；所述的步骤（2）不定芽诱导培养基配方为：MS培养基+6-BA1.0mgL+NAA0.15gL+蔗糖30gL，培养基中琼脂含量为0.7%；光照条件6000lx，光照时间为12hd；所述的步骤（3）继代增殖培养基配方为：MS培养基+6-BA1.0mgL+NAA0.5mgL+蔗糖50gL，培养基中琼脂含量为0.7%；所述的步骤（4）扦插生根的基质由体积比3:1:1的草炭、珍珠岩和蛭石制成；所述的蛭石是由以下方法制备得到的：称取1.00g的壳聚糖置于装有200mL的2%乙酸水溶液的烧杯中，在60℃下机械搅拌2h得到均匀透明的壳聚糖乙酸水溶液；将粉碎至80目蛭石，按固液比1:10将膨胀蛭石加入到壳聚糖乙酸水溶液，在60℃恒温下搅拌2h，待壳聚糖完全溶解；60℃下恒温搅拌6h，陈化12h后抽滤分离，制得壳聚糖修饰蛭石分散液，洗涤，60℃下烘干后即得壳聚糖修饰的蛭石。

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