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龙图腾网恭喜澳门科技大学申请的专利钩藤中四种生物碱含量的测定方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN113791100B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-04-29发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202110911631.9，技术领域涉及：G01N24/08；该发明授权钩藤中四种生物碱含量的测定方法是由姜志宏;张伟;尹田鹏;朱国元;卢敬光设计研发完成，并于2021-08-10向国家知识产权局提交的专利申请。

本钩藤中四种生物碱含量的测定方法在说明书摘要公布了：本发明属于药物分析技术领域，公开了钩藤中四种生物碱含量的测定方法。该测定方法，包括以下步骤：1制备钩藤总碱供试液；2向步骤1制备的钩藤总碱供试液中加入内标物，然后装入核磁管内，进行定量核磁共振氢谱测试，分别对内标物和四种生物碱的选定信号进行积分；3利用公式进行计算，分别得出四种生物碱在钩藤总碱中的含量。本发明采用定量氢核磁分析技术对钩藤中四种生物碱含量进行测定，不需要以标准对照品制备工作曲线，使用已知普通化学物质为参比即可，能够大大节省测试成本；且样品测试前处理简单，测试时间短，测定结果具有良好的线性、灵敏度、精密度和准确度。

本发明授权钩藤中四种生物碱含量的测定方法在权利要求书中公布了：1.钩藤中四种生物碱含量的测定方法，所述四种生物碱为钩藤碱、异钩藤碱、柯诺辛碱和异柯诺辛碱，其特征在于，包括以下步骤：1取钩藤样品制备钩藤总碱供试液；2向步骤1制备的钩藤总碱供试液中加入内标物，进行定量核磁共振氢谱测试，分别对所述内标物和所述四种生物碱的选定信号进行积分；3利用公式CX＝100％×SX×mI.S×MXSI.S×MI.S×mTA计算，分别得出待测生物碱在钩藤总碱中的含量；其中：CX是待测生物碱在钩藤总碱中的含量，SX和SI.S分别是所述钩藤样品中待测生物碱和内标物定量峰的积分面积，MX和MI.S分别是所述钩藤样品中待测生物碱和内标物定量峰的摩尔分子量，mTA和mI.S分别是所述钩藤样品中钩藤总碱和内标物的质量；在步骤1中，制备钩藤总碱供试液的过程为：将钩藤样品粉碎，采用酸溶液提取，然后调节pH为碱性，再用有机溶剂萃取，干燥，制得钩藤总碱，最后将所述钩藤总碱溶于氘代溶剂中，制得钩藤总碱供试液；在步骤2中，采用t1ir脉冲确定各定量峰的纵向弛豫时间，所述钩藤碱、异钩藤碱、柯诺辛碱和异柯诺辛碱的纵向弛豫时间分别为0.99s、0.99s、1.40s、1.11s，所述内标物的纵向弛豫时间为2.33s；步骤2中所述选定信号为NH信号，并以所述NH信号为定量峰，二维HMBC谱进一步显示以上NH具有专属性，作为定量峰；在步骤2中，在DMSO-d6中，所述钩藤碱、异钩藤碱、柯诺辛碱和异柯诺辛碱的NH信号峰分别位于δH10.11s、δH10.32s、δH10.13s和δH10.33s；在步骤2中，核磁共振波谱测试的参数为：偏转角＝90°，弛豫延迟时间＝10s，时域数据长度＝65536，扫描次数＝64，谱宽＝16.0221ppm，采样时间＝3.408s，探针温度＝300K。

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