恭喜江南大学庞庆丰获国家专利权
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龙图腾网恭喜江南大学申请的专利一种小鼠条件性诱导Hmox1基因敲除模型的构建方法及应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116019063B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-04-29发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202211296862.4,技术领域涉及:C12N15/90;该发明授权一种小鼠条件性诱导Hmox1基因敲除模型的构建方法及应用是由庞庆丰;吴亚先;高智琦;陈丹;张艳丽;李胜朋;满凌云设计研发完成,并于2022-10-21向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种小鼠条件性诱导Hmox1基因敲除模型的构建方法及应用在说明书摘要公布了:本发明公开了一种小鼠条件性诱导Hmox1基因敲除模型的构建方法及应用,属于生物技术领域。本发明提供的小鼠条件性诱导Hmox1基因敲除模型由以下步骤构建:构建同源重组DNA载体;通过体外转录获得Cas9mRNA和针对Hmox1基因的gRNA;将同源重组DNA载体、Cas9mRNA和gRNA注射到小鼠的受精卵中;培育获得条件性基因敲除小鼠;通过测序和核酸胶电泳鉴定基因型;得到的条件性敲除小鼠与其他组织特异性表达Cre的小鼠杂交获得相应组织或细胞条件性敲除小鼠,从而实现特定组织或细胞类型的精准研究;并且证明Hmox1诱导性条件性敲除明显加重急性肺损伤。本发明能够克服现有技术中Hmox1全身基因敲除小鼠胚胎致死,无法构建小鼠模型的困难,辅助Hmox1在疾病中的研究。
本发明授权一种小鼠条件性诱导Hmox1基因敲除模型的构建方法及应用在权利要求书中公布了:1.一种构建Hmox1诱导性基因敲除小鼠动物模型的方法,其特征在于,所述方法为:(1)针对FloxP位点设计Cas9gRNA和DonorDNA质粒,在第二个外显子的两边定点插入FloxP位点,所述第二个外显子的氨基酸序列如SEQIDNO.28所示,gRNA的序列如SEQIDNO.25或SEQIDNO.26所示;(2)将DonorDNA质粒以及Cas9gRNA植入野生型小鼠的受精卵中,并将受精卵移植至野生型小鼠,该小鼠产下仔鼠即F0代小鼠;(3)将F0代小鼠与野生型小鼠杂交,获得F1代杂合子;(4)将F1代杂合子互配,繁育得到F2代小鼠,即为Hmox1-FloxP小鼠;(5)将Hmox1-FloxP小鼠与组织特异性表达Cre的小鼠杂交获得稳定遗传子代。
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