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龙图腾网恭喜青岛科技大学申请的专利一种测定右旋糖酐酶活力的方法及其应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN115992198B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-04-29发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202211420452.6，技术领域涉及：C12Q1/34；该发明授权一种测定右旋糖酐酶活力的方法及其应用是由张永勤;董静文;陈相玉;邬雅喃;刘银春;刘建瑞;刘芳设计研发完成，并于2022-11-14向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种测定右旋糖酐酶活力的方法及其应用在说明书摘要公布了：本发明属于酶活力测定技术领域。针对现有的右旋糖酐酶活力测定技术存在的灵敏度低、标准曲线截距偏离坐标轴原点的问题，本发明公开一种测定右旋糖酐酶活力的方法及其应用，具体包括以下步骤：a.底物的精制；b.酶活力测定：制作用MBTH法测得的葡萄糖吸光度值与其相应浓度的标准对应关系曲线；用MBTH法检测待测右旋糖酐酶水解右旋糖酐后产生的相当于葡萄糖的吸光度值；推算右旋糖酐酶的活力；c.牙膏以及漱口水中酶活力的测定。本发明的酶活力测定方法灵敏度高，所用葡萄糖标准曲线以及相应的酶浓度曲线的截距均接近于零，样品的稀释倍数不会影响酶活力测定的准确性。

本发明授权一种测定右旋糖酐酶活力的方法及其应用在权利要求书中公布了：1.一种测定右旋糖酐酶活力的方法，其特征在于，包括以下步骤：1精制底物：a.将右旋糖酐粉碎，制成右旋糖酐粉末；b.将右旋糖酐粉末分散于35％-70％的乙醇溶液中，充分搅拌，离心，弃去上清液，可重复该步骤数次，将右旋糖酐粉末中的小分子物质除去；c.采用浓度递增的乙醇溶液对步骤b得到的沉淀进行逐级脱水，所采用的乙醇溶液的浓度为80％-100％；d.将丙酮加入到步骤c得到的沉淀中，超声后静置，在高真空度条件下减压旋蒸，得到干燥的精制底物，所述的高真空度是指其压力≤-0.089MPa；如果右旋糖酐的重均分子量≥70kDa且最小分子量大于10kDa，则可直接作为精制底物使用，省略上述精制步骤；2配制底物溶液及右旋糖酐酶溶液：将步骤1的精制底物加入到浓度为0.1-1molL强碱溶液中，充分混匀使其溶解，加入酸调pH至待测pH值，用待测pH值的缓冲溶液定容，从而得到底物溶液；用同一所述缓冲溶液配制右旋糖酐酶溶液；3绘制葡萄糖吸光度值与葡萄糖浓度的标准对应关系曲线：用步骤2配制的底物溶液，配制一系列浓度梯度的葡萄糖标准溶液，所述一系列浓度梯度的葡萄糖标准溶液中的底物的浓度相同，并且葡萄糖浓度范围在0-0.5mmolL；向所述一系列浓度梯度的葡萄糖标准溶液中加入碱性试剂得到碱性葡萄糖标准溶液，所述碱性葡萄糖标准溶液中的碱性试剂的浓度相同，加入新鲜配制的MBTH试剂，体系中OH-浓度在0.02-0.2molL范围内，MBTH的初始浓度范围为0.3-4.5mmolL，DTT的初始浓度范围为0-1.6mmolL，在50-100℃条件下反应5-180min，再加入酸性铁试剂，反应体系变成酸性，体系中其H+浓度为0.02-0.3molL，Fe3+的初始浓度范围为1-6mmolL，发生显色反应，显色稳定后在580-680nm波长下测定吸光度值，根据每组葡萄糖浓度与测得的吸光度值之间的关系绘制标准对应关系曲线；所述的MBTH试剂是由MBTH和DTT配制而成的水溶液，或者只由MBTH配制而成的水溶液；所述的酸性铁试剂是由可溶性Fe3+盐和强酸配制而成的水溶液；4右旋糖酐酶的酶解反应：向右旋糖酐酶溶液中加入步骤2配制的底物溶液，保证所得溶液中底物的浓度与步骤2葡萄糖标准溶液中底物的浓度相同，然后进行酶解反应，再加入碱性试剂，终止酶解反应，得到碱性酶解液，所述碱性酶解液中碱性试剂的浓度与步骤2碱性葡萄糖标准溶液中碱性试剂的浓度相同；5制备碱性酶解空白溶液；6测定碱性酶解液和碱性酶解空白溶液：参照步骤3的方法进行MBTH反应，测定步骤4得到的碱性酶解液和步骤5得到的碱性酶解空白溶液的吸光度值，从而获得酶解产生的还原端基浓度，进而得到右旋糖酐酶活力。

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